يو التكنولوجيا الثقيلة - تطبيق الصناعة

كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ( هبلك ) هي واحدة من أدوات الاختبار المستخدمة في المختبرات التحليلية . في عملية استخدام هذه الأداة ، فإنه لا مفر من أن هناك العديد من المشاكل ، وسوف تؤثر بشكل مباشر على دقة البيانات المقاسة و العمل العادي من الصك . إذا كان المشغل يمكن أن نفهم أسباب الفشل ، يمكن أن تكون واضحة حول طرق الوقاية والقضاء على هذه الأخطاء ، يمكن استخدام الجهاز بشكل صحيح و زوي إلى أقصى حد من أداء الجهاز . اليوم نود أن أطلعكم على بعض الأسئلة التي تحتاج إلى الاهتمام في استخدام كروماتوجرافيا سائلة من الجوانب التالية .

برنامج تحليل تكوين سطح برنامج تحليل عينة نظام المعالجة السطحية برنامج تحليل صلابة اختبار الميكانيكية اختبار عينة القياسية

استخدام أنبوب اختبار

1 . تنظيف أنابيب الاختبار . كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء هو طريقة حساسة جدا ، إذا كان استخدام أنبوب اختبار نجس ، وسوف تؤثر على دقة نتائج الاختبار . على سبيل المثال ، عندما يتم استخدام الميثانول والمذيبات حل العينة ، أنبوب اختبار صغير يستخدم سدادة مطاطية لجعل غطاء ، وبالتالي ، في كل مرة يتم حقن العينة ، هناك تدخل الذروة التي هي ثابتة في الوقت الاحتفاظ ، وبعد التحقق من أن تدخل الذروة الناجمة عن المكونات الذائبة من الميثانول مغمورة في سدادة مطاطية ، بعد استبدال الزجاج أنبوب اختبار ، تدخل الذروة هو القضاء عليها .

2 . البلاستيك أنبوب اختبار حل المشكلة . في السنوات الأخيرة ، يمكن التخلص منها البلاستيك أنبوب اختبار جلبت راحة كبيرة ، ولكن في عملية استخدام المذيبات العضوية يجب أن تدفع الانتباه إلى حل ظاهرة أنبوب اختبار ، في حين أن استخدام هذا النوع من أنبوب اختبار استخراج العينات ، بعض المذيبات العضوية ( مثل lvfang ) قد حل الظاهرة على جدار الأنبوب ، هذه المواد الذائبة في بعض الأحيان يمكن أن تنتج إشارة على كاشف ، وبالتالي التدخل في تحديد العينة . في هذا الوقت ، يمكن استخدام نفس الظروف التجريبية اختبار لمعرفة ما إذا كان لا يحتوي على استخراج السائل في كاشف يمكن أن تنتج إشارة التدخل ، إذا كان هناك تدخل إشارة ، فقط استخدام المذيبات العضوية مقاومة الزجاج أنبوب اختبار .

3 - امتصاص العينة على جدار الأنبوب . وينبغي إيلاء الاهتمام لهذه المشكلة ، وإلا فإنه سوف يؤثر أيضا على دقة نتائج الاختبار ، في رصد المخدرات العلاجية ( TDM ) ، بعض الأدوية مثل أميتريبتيلين ، إيميبرامين ، وما إلى ذلك من السهل أن كثف على جدار أنبوب زجاجي ، لذلك ، ينبغي أن تستخدم عملية أنبوب البولي بروبلين ، من أجل منع استخراج الامتزاز الظاهرة ، يمكن استخدام 0.5 في المائة من الهكسين كما extractant ، يمكن أن تمنع بشكل فعال .

ثانيا ، تشغيل صمام مدخل

في الوقت الحاضر ، تستخدم عادة في تحليل الكروماتوجرافي السائل هو نوع من صمام مدخل 7725 ، صمام مدخل الهيكل الداخلي يجعل عملية أخذ العينات مريحة للغاية ، ولكن إذا كان الاستخدام غير السليم ، وسوف تجلب أيضا مشاكل . على سبيل المثال ، في عملية اختبار الكروماتوجرافى السائل ، في بعض الأحيان غير طبيعي الكروماتوجرافى القمم تظهر و التكاثر ليست جيدة ، وهذا هو أساسا بسبب سوء أساليب التشغيل ، من أجل حل هذه المشكلة ، يجب أن تبدأ من الجوانب التالية .

1 . مراقبة كمية العينة . عند استخدام صمام مدخل العينة ، عينة حلقة في صمام هو كمي ( حجم العينة حلقة في التحليل العام نوع صمام مدخل هو 20ul ) ، لأن حقن عينة الحل في عينة صمام مدخل شعاعي التدرج في السرعة في خط أنابيب من عينة حلقة ( أي سرعة تدفق السائل في أنبوب رمح أسرع من جدار الأنبوب ) . ولذلك ، من أجل ملء حلقة عينة مع عينة من الحل ، وذلك باستخدام صمام مدخل لتحديد بدقة ، يجب أن يكون حجم العينة أكبر من مرتين من حجم العينة حلقة . إذا كان الحقن المستخدمة للسيطرة على حجم العينة ، ثم زوي يمكن حقن فقط 1 / 2 من حجم العينة حلقة ، وذلك لمنع بعض العينات من تجاوز أنبوب ، مما أدى إلى خطأ في التحليل الكمي .

2 ، عينة صمام التنظيف . إذا كان هناك أي بقايا في حلقة العينة التي تم حقنها في المرة الأخيرة ، فإنه بالتأكيد سوف تلوث العينة التي يتم حقنها في المرة القادمة لمنع هذا من الحدوث ، اتبع الخطوات التالية : أ . أولا ، في موقع التحميل ، حقن الحقنة في مرحلة الجوالة في صمام عينة عدة مرات ، كل جرعة من حوالي 40ul ؛ ب ، ثم سحب لوحة صمام عينة إلى موقع inject ، ثم شطف مع المرحلة الجوالة عدة مرات ، كل جرعة من 40ul ؛ ج زوي ، ثم حقن العينة في صمام عينة .

وفقا للخطوات المذكورة أعلاه ، والتلوث الناجم عن أخذ العينات صمام يمكن تجنبها ، وبالتالي القضاء على التدخل الذروة وتحسين دقة تحليل النتائج .

3 ، عينة صمام أنبوب الفائض انسداد . في بعض الأحيان ، تجاوز أنبوب صمام عينة سوف يحدث انسداد ، حقن عينة صمام ، حقن الإبرة لا تتحرك . هذا الفشل هو بسبب انسداد أنبوب الفائض . انسداد في الغالب بسبب حل المرحلة المحمول من العينة باستخدام محلول الملح الذي تبلور في ميناء التفريغ من تجاوز الأنابيب . عند هذه النقطة ، كوب صغير يمكن أن تحتوي على كمية صغيرة من الماء المقطر إلى تجاوز فوهة مغمورة قليلا ، كريستال الملح في ميناء يمكن حلها ، واستكشاف الأخطاء وإصلاحها . إذا كان الملح في أنبوب الفائض يمكن غسلها مرارا وتكرارا مع الماء المقطر بعد الانتهاء من أخذ العينات في كل مرة ، خطأ يمكن تجنبها .

ثالثاً - مشاكل المرحلة المتنقلة

الميثانول الأسيتونيتريل غالبا ما تستخدم في إعداد المرحلة المحمول في السائل اللوني . الكواشف المستخدمة عادة في اللوني السائل هي الكواشف عالية الجودة ، مثل الكواشف الكروماتوغرافي النقي . . . . . . . عندما متطلبات ليست صارمة جدا ، عالية النقاء أو حتى الكواشف التحليلية يمكن استخدامها . الأشعة فوق البنفسجية للكشف عن غالبا ما تستخدم في التحليل الكروماتوغرافي السائل . ولذلك ، من أجل الحد من الضوضاء الأساسية وتحسين تحليل الحساسية ، نقية كاشف الكروماتوغرافي مع القليل من امتصاص الأشعة فوق البنفسجية و القليل من الشوائب ينبغي أن تستخدم .

1 . تصفية المرحلة المحمول إعداد المرحلة المحمول يجب أن يصفى مع 0.5um microporous غشاء الترشيح قبل الاستخدام . هذا هو لأن الحل يحتوي على العديد من الجزيئات الصغيرة التي يصعب العثور عليها بالعين المجردة ، إذا لم يتم تصفيتها ، سوف تسد مضخة ، فلتر على رأس العمود ، وهذا سوف يسد الطريق الطبيعي من مرحلة الجوالة ، العمود الكروماتوجرافى زيادة المقاومة ، وارتفاع ضغط العمود ، العمود الكفاءة . في هذه الحالة ، يجب تغيير فلتر المرحلة المحمول ، وإزالة انسداد فلتر و نقع في 20 ٪ من محلول حمض النيتريك ، وتنظيف آلة التنظيف بالموجات فوق الصوتية لمدة 20 دقيقة لإزالة انسداد فلتر .

2 ، مرحلة الجوالة التفريغ . مرحلة الجوالة يجب إزالتها قبل استخدامها لإزالة الغازات الذائبة في مرحلة الجوالة قدر الإمكان ، وإلا فإن هذه الغازات سوف تقلل من أداء العمود التعبئة والتغليف ، ولكن أيضا للكشف عن إشارة إلى تدخل كبير . هناك العديد من الطرق لإزالة الغاز ، مثل بالموجات فوق الصوتية ، فراغ ، النيتروجين ، وهلم جرا . في الوقت الحاضر ، فراغ إزالة الغاز والنيتروجين تدفق الغاز إزالة الغاز هي طرق تستخدم عادة في زوي . كمية كبيرة من فقاعات الهواء يمكن أن تنتج عندما يخلط الماء مع الميثانول . إذا لم يتم إزالة الغاز ، فقاعات الهواء يمكن أن تدخل العمود الكروماتوجرافى و كاشف ، والتي سوف تؤثر على عملية التحليل .

استخدام وصيانة العمود الكروماتوجرافى

العمود الكروماتوجرافى هو العنصر الرئيسي في السائل الكروماتوجرافى زوي . أداء العمود الكروماتوجرافى يلعب دورا حاسما في تحديد ما إذا كانت المواد التي يجري اختبارها يمكن فصلها بشكل جيد . ولذلك ، في العمل اليومي ، ينبغي إيلاء اهتمام خاص إلى الاستخدام الصحيح وصيانة العمود الكروماتوجرافى ، من أجل إطالة أمد الحياة من العمود الكروماتوجرافى .

1 . استخدام ما قبل العمود وحماية العمود . precolumn هي التي شنت بين المضخة و حاقن ، ويوفر التوازن بين مرحلة الجوالة في العمود الكروماتوجرافى ، ويمنع العناصر أو الملوثات التي يمكن أن تضر العمود التعبئة من دخول العمود الكروماتوجرافى . حماية العمود يمكن أن تمنع العناصر التي يمكن أن كثف بقوة على العمود من الدخول في العمود ، العمود الواقي يجب أن يكون نفس العمود التعبئة . قبل العمود و العمود الواقية يمكن استبدالها في كثير من الأحيان ، دون الحاجة إلى استبدال العمود الكروماتوجرافى في كثير من الأحيان ، مما يطيل من عمر خدمة العمود الكروماتوجرافى .

2 . منع الغاز من دخول العمود الكروماتوجرافى . بعض الأعمدة ( على سبيل المثال ، هلام الأعمدة ) لا تسمح بدخول الفقاعات ، أو أنها سوف تقلل من كفاءة العمود ، أو حتى شكل صغير من الصعب إزالة غرفة الهواء . ولذلك ، من أجل منع فقاعات الهواء من دخول العمود الكروماتوجرافى ، مرحلة الجوالة بعد التفريغ يجب أن تستخدم ، العمود الكروماتوجرافى يجب أن تكون مثبتة بدقة وفقا للخطوات التالية . أ - إزالة المسمار الختم في مدخل العمود الكروماتوجرافى لمراقبة ما إذا كان هناك تسرب المذيبات ؛ ب - إذا كان هناك تسرب المذيبات ، يمكنك ربط العمود الكروماتوجرافى على خط لتجنب دخول فقاعة . ج - إذا كان هناك أي تسرب المذيبات ، مما يدل على أن نهاية العمود الكروماتوجرافى قد دخلت في الهواء ، في هذا الوقت ، يمكن أن تكون مرتبطة إلى نهاية العمود الكروماتوجرافى منفذ صمام مدخل ، مرحلة الجوالة عكس اتجاه العمود الكروماتوجرافى شطف الهواء داخل العمود . إذا كان معدل تدفق المذيب هو سريع جدا ، أو إذا كان الضغط يرتفع فجأة ، أداء العمود سوف تنخفض . د - إذا كان تدفق المذيبات لا تحتوي على فقاعات الهواء ، الغاز في العمود قد تم تفريغها ، ثم العمود الكروماتوجرافى في الاتجاه الصحيح ، بحيث فقاعة لا يمكن أن يدخل العمود الكروماتوجرافى .

3 . تنظيف العمود الكروماتوجرافى من أجل الحفاظ على المواد والشوائب في العمود الكروماتوجرافى ، العمود الكروماتوجرافى يجب تنظيفها في الوقت المناسب بعد كل تحليل العينة . أولا ، يجب استخدام المذيبات التي لديها قدرة قوية على eluent العمود الكروماتوجرافى ، على سبيل المثال ، عكس المرحلة الكروماتوجرافى التحليل المستخدمة عادة في تحليل العمل ، لأن المواد التي تتدفق أولا هو مادة قطبية كبيرة ، ثم استخدام 100 ٪ من الميثانول أو استخدام الايزوبروبيل نقية ، رباعي هيدرو الفوران وغيرها من المذيبات القطبية ضعيفة قليلا في العمود امتزاز قطبية صغيرة eluent ، واستخدام eluent عموما 20 مرة من حجم العمود . إذا كانت المرحلة المحمول هو حل العازلة ، ثم شطف العمود مع الماء المقطر لإزالة الملح من العمود ثم شطف مع المذيبات المناسبة . . . . . . .

جل الأعمدة المستخدمة في الترشيح اللوني ( GEL ) غالبا ما تستخدم في حل العازلة مثل مرحلة الجوالة ، وبطبيعة الحال ، ينبغي غسلها بالماء المقطر بعد استخدامها . إذا كانت العملية مستمرة ، حل العازلة يمكن وضعها بين عشية وضحاها في العمود ، ولكن الحفاظ على معدل تدفق صغير ( < 0.5ml / min ) لمنع هطول الأمطار من الملح العازلة ، إذا كان يحتوي على هاليد في المرحلة المتنقلة ، حتى بين عشية وضحاها ، العمود يجب غسلها بالماء المقطر لمنع التآكل من العمود .

4 . تخزين العمود الكروماتوجرافى . إذا كان العمود الكروماتوجرافى لا تستخدم مؤقتا ، وإيلاء الاهتمام إلى النقاط التالية أثناء التخزين :

أ - في غضون بضعة أيام من وضع على المدى القصير ، ينبغي أولا استخدام المذيبات شطف العمود الكروماتوجرافى ( مثل هلام العمود مع الماء المقطر شطف ) ، ثم اثنين من نهاية العمود الكروماتوجرافى مختومة مع مسامير .

ب - إذا كان العمود الكروماتوجرافى لا تستخدم لفترة طويلة ، فقط باستخدام الأساليب المذكورة أعلاه لا يمكن معالجتها ، ثم ينبغي استخدام العمود الكروماتوجرافى باستخدام المذيبات المحددة في تعليمات لملء العمود الكروماتوجرافى ، عكس المرحلة العمود عموما استخدام الميثانول ، العمود العادي يمكن استخدام الهكسين أو هيبتان ، هلام العمود لا يمكن استخدام المياه ، إذا كان هناك نمو الكائنات الحية الدقيقة في العمود سوف يقلل من كفاءة العمود ، في هذا الوقت ، استخدام 0.05 ٪ من محلول مائي ( حافظة ) غسل العمود الكروماتوجرافى ، ثم ختم العمود الكروماتوجرافى . عندما يتم وضع العمود الكروماتوجرافى لفترة طويلة ، كلا طرفي العمود الكروماتوجرافى يجب أن تكون مختومة بإحكام لمنع الانكماش الناجم عن تبخر المذيبات .

ج - العمود يجب أن تكون مخزنة في درجة حرارة الغرفة ، إذا وضعت في 0 درجة مئوية أو أقل ، العمود سوف تجمد ، والتي سوف تؤدي أيضا إلى انخفاض كفاءة العمود .

قمم مزدوجة الكروماتوغرافي

بعد فترة طويلة من استخدام العمود الكروماتوجرافى ، إذا كان هناك شوائب في الدخول ، مرحلة ثابتة في مدخل العمود الكروماتوجرافى " تصلب " في إطار العمل من الضغط العالي المتولد من مرحلة المحمول ، وصمة عار على شكل انهيار الكروماتوجرافى العادي ذروة تحليل عينة العنصر يصبح النسقين ، ثم العمود الكروماتوجرافى يمكن اصلاحها بالطريقة التالية . أولا ، المسمار إبزيم الجوز من العمود ، ثم سوف تجد أن مرحلة ثابتة في العمود قد تم ضغطها ، عندما تكون خطيرة ، يمكن أن تتراجع أكثر من 10 ملم . في هذه الحالة ، يمكننا استخدام إبرة تلميح لسحب جزء من المرحلة المحمول سطح لوحة صفراء ، وملء المنطقة المنهارة مع نفس المرحلة الثابتة ، والضغط ، ثم تشديد المسمار تثبيت العمود الكروماتوجرافى ، وإصلاح العمل على الانتهاء . عندما يتم استخدام العمود الكروماتوجرافى بعد إصلاح لجعل عينة الكروماتوجرافى ذروة العودة إلى وضعها الطبيعي .

هذه الورقة يقدم باختصار الاستخدام الصحيح و طريقة حل المشاكل الكروماتوجرافى من عدة جوانب . في العمل اليومي ، إذا نحن يمكن أن تأخذ هذه المسائل على محمل الجد ، حل المشاكل في الوقت المناسب ، سوف يطيل كثيرا من الحياة العادية من الصك ، وأدائها إلى أقصى حد زوي .