خطأ واحد : أكثر من قناة أفضل أداة

مع نضوج تقنية PCR ، متعدد التضخيم هو الحصول على أكثر وأكثر حيوية ، مضان الكمية PCR الصك ليست بمنأى عن ذلك . من زوي في وقت مبكر من أبي عرض قناة واحدة مضان الكمية PCR أداة للتنمية في الوقت الحاضر كل مصنع عرض 4 قنوات ، 5 قنوات أو حتى 6 قنوات مضان الكمية PCR أداة ، خيار الابهار ترك الناس في حيرة ، بعض الناس بطريق الخطأ دخلت " أكثر من قناة أفضل " خطأ .

في حين أن بعض الشركات المصنعة استخدام 5-channel fluorimetric مقاييس ، روكس ( صبغة الفلورسنت ) أو إشارة dye يجب أن تستخدم في التجارب للتأكد من صحة ودقة النتائج التجريبية . وهكذا ، هناك أربعة فقط من القنوات الفعالة التي يمكن الكشف عن إشارات الفلورسنت متعددة PCR ، واستخدام تصحيح صبغ قد تزيد من تكلفة استخدام في وقت لاحق . بعض من الكشف عن قنوات الفلورسنت الكمية PCR مفتوحة فقط لصبغ الفلورسنت أو كاشف من الشركات المصنعة الخاصة بهم ، وفعالية الكشف عن القنوات ليست كما ادعى العديد من المواد الدعائية . من المهم بصفة خاصة للتأكد من فعالية الكشف عن قناة مضان الكمية PCR قبل الشراء . النظر في عدد من القنوات في الوقت الحقيقي بوليميريز سلسلة من ردود الفعل يجب أن تبدأ أيضا من واقع المختبر ، بوليميريز سلسلة من ردود الفعل ليست متاحة للجميع ، لأنها تجعل من تجربة معقدة .

الخطأ الثاني : الوقت الحقيقي الاسترداد دون التدرج

على الرغم من أن هناك أنواع مختلفة من برامج التصميم التمهيدي الاسترداد أو صيغة تجريبية لحساب درجة حرارة انصهار ( TM ) في كمية تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) باستخدام طريقة صبغ ، هناك اختلافات كبيرة في TM القيم بين مختلف الصيغ و التمهيدي متواليات . درجة حرارة انصهار الاشعال يحدد درجة حرارة التخمير . وعلاوة على ذلك ، فإن مجموعة من القواعد في القالب هو متغير للغاية ، وخاصة بالنسبة للجزء ، البيانات التي تم الحصول عليها من صيغة تجريبية لا يمكن الحصول على نتائج دقيقة ، الفروق الدقيقة في درجة حرارة التخمير قد يكون لها تأثير حاسم على النتائج ، حتى " لمس الظروف " كان صداع . ظهور التدرج PCR جزئيا يحل بعض المشاكل - التحكم في درجة الحرارة في كل مسام يمكن أن تتغير في نطاق التدرج في رد الفعل .

ليس فقط درجة حرارة التخمير ، ولكن أيضا لمسخ درجة الحرارة وتمديد درجة الحرارة يمكن أن يكون الأمثل -- وهذا أمر مهم بالنسبة لمعظم عالية الدقة طق الانزيمات التي تم تضخيمها من قبل العديد من polymerases مختلطة مثل invitrogen ، clontech ، Promega ، لأن * درجة حرارة التفاعل بين طق و تصحيح الانزيمات قد تختلف اختلافا كبيرا ، لذلك من المهم تحسين تمديد درجة الحرارة .

عملية التحسين التي يمكن أن تكتمل في وقت واحد من قبل العديد من التجارب باستخدام مضان الكمية PCR مع التدرج في وظيفة .