البيئة الخلوية نظام التصوير يمكن رصد حالة نمو الخلايا ، والتغيرات المورفولوجية ، فضلا عن الأنشطة الأيضية في الوقت الحقيقي ، ومساعدة الباحثين على فهم الحالة الفسيولوجية والرد على الخلايا أكثر دقة . من خلال تسجيل وتحليل بيانات الصورة بشكل دوري ، شذوذ ، مثل cytotoxicity ، ونقص التغذية ، أو عدوى الممرض ، يمكن العثور عليها في الوقت المناسب ، وبالتالي تحسين ظروف زراعة الخلايا أو حل المشاكل .

أساسيات نظام تصوير البيئة الخلوية :

1 - تكنولوجيا التصوير الضوئي : البيئة الخلوية نظام التصوير يعتمد هيكل المجهر المقلوب ، يدمج المرحلة النقيض المكثف ، عدسة الهدف وغيرها من المكونات البصرية . هذه العناصر تعمل بشكل تعاوني حتى أن الضوء يمكن أن تشع بدقة على عينة من الخلايا التي يجري رصدها ، وجمع الضوء المنعكس أو المنقولة على شكل صورة واضحة . وفي الوقت نفسه ، جنبا إلى جنب مع الكاميرا مع حساسية عالية ، الإشارات الضوئية يمكن تحويلها إلى الصور الرقمية ، والتي يمكن أن تدعم العديد من طرق التصوير مثل حقل مشرق ، مضان ، تأثير الإغاثة ، وما إلى ذلك ، وبالتالي تلبية مختلف الاحتياجات التجريبية . . . . . . .

2 - العلامات الفلورسنت ودينامية الملاحظة : استخدام صبغة الفلورسنت محددة ، يمكن أن تكون محددة في الخلية أو البروتين عضية العلامات . مع مساعدة من مضان المجهر ، نشاط الخلية يمكن أن تتغير من ساكنة " لقطة " إلى دينامية " فيلم " ، والتي يمكن أن تظهر في الوقت الحقيقي داخل الخلية ، مثل النقل الجزيئي ، تفاعل الجهاز ايليس ، وهلم جرا .

3 - التحكم الآلي والصيانة البيئية : كما تم تجهيز نظام التحكم الآلي ، يمكن أن تنظم بدقة درجة الحرارة والرطوبة ، تركيز ثاني أكسيد الكربون وغيرها من المعالم البيئية ، من أجل توفير بيئة مستقرة ومناسبة لنمو الخلايا . هذا ليس فقط يضمن نشاط الخلايا أثناء التجربة ، ولكن أيضا يقلل من الاضطرابات الناجمة عن التغيرات في العوامل البيئية ، وتحسين دقة وموثوقية التجربة .

الاحتياطات اللازمة لاستخدام نظام تصوير البيئة الخلوية :

1 . مصباح الزئبق استخدام المواصفات : مصباح الزئبق التبديل يجب أن لا تتكرر في كثير من الأحيان ، والتبديل بين اثنين يجب أن تصل إلى أكثر من 30 دقيقة ، أو قد تؤثر على حياة مصباح الزئبق والأداء .

2 - التحكم في درجة الحرارة المحيطة : غرفة المجهر يجب الحفاظ على درجة حرارة منخفضة البيئة ، درجة حرارة ثابتة تساعد على الحفاظ على دقة الجهاز و حالة الخلية ، والحد من التقلبات في درجة الحرارة الناجمة عن الخطأ .

3 - تدابير لمنع الضوء والاهتزاز : أثناء التجربة ، ينبغي إيلاء الاهتمام لتجنب الضوء ، ومنع الضوء على الخلايا من التلف أو التدخل في النتائج التجريبية . وفي الوقت نفسه ، فإنه يتجنب الاهتزاز ، لأن الاهتزاز يمكن أن يؤدي إلى طمس الصورة ، والتركيز على التحول وغيرها من المشاكل ، مما يؤثر على جودة الصورة .

4 - النقاط الرئيسية في اختيار وسائل الإعلام : عند إعداد العينات ، وسائل الإعلام يجب أن لا تحتوي فقط على المواد الغذائية المناسبة لتعزيز نمو الخلايا ، ولكن أيضا النظر في عوامل مثل قيمة الرقم الهيدروجيني ، قدرة التخزين المؤقت و الضغط الاسموزي . مناسبة متوسطة الثقافة يمكن أن تؤثر على التعبير المظهري والمظهر سلوك الخلايا . واقترح استخدام الفينول الأحمر مجانا متوسطة وانخفاض تركيز المصل للحد من الخلفية إشارة .

5 - متطلبات التشغيل العقيم : في عملية جمع الخلايا ، عملية العقيم يجب أن تنفذ بدقة لمنع التلوث . الجسيمات الخارجية أو شظايا الخلية يمكن أن تتداخل مع جودة الصورة و تؤثر على دقة التجربة .

6 - ضرورة التحقيق الأمثل : قبل إجراء التجارب الرسمية ، وتركيز وقت الحضانة مسبار الفلورسنت يجب أن يكون الأمثل . ليس فقط لضمان بقاء الخلية لا تتأثر بعد الحضانة ، ولكن أيضا لضمان أن كثافة إشارة مضان المناسبة يمكن الكشف عنها . وعلاوة على ذلك ، يمكن أن تقلل من خلفية مضان بإضافة غسل خطوة .

7 - استقرار الظروف البيئية : مراقبة صارمة والحفاظ على استقرار الظروف البيئية ، بما في ذلك درجة الحرارة والرطوبة والغازات ( الأكسجين وثاني أكسيد الكربون ) طوال عملية التصوير . بيئة مستقرة ليس فقط تحافظ على صحة الخلايا ، ولكن أيضا يقلل من خطر تحول التركيز . على سبيل المثال ، يجب التأكد من أن لوحة microporous يقع على طاولة أو في غرفة التحكم البيئي لتحقيق التوازن الحراري قبل تكوين مجموعة الإعداد . إذا كان المتوسط هو إضافة إلى ثقب أثناء تأخير التجربة ، تأكد من أن درجة الحرارة هي نفسها كما أن المتوسط في التصوير حاوية .

8 - عدسة الهدف التدفئة وحدة التطبيق : استخدام المياه أو النفط عدسة التصوير التجربة ، لأن عدسة الهدف من خلال وسائل الإعلام الاتصال مع عينة ، عدسة الهدف درجة الحرارة سوف يكون لها تأثير كبير على عينة ، في هذا الوقت يجب أن تكون مجهزة عدسة الهدف التدفئة وحدة لضمان أن العينة في درجة حرارة مناسبة للبيئة .

9 - البؤري نظام التحكم : الاستفادة الكاملة من البرمجيات التركيز التلقائي وظيفة ( مثل bestfocus ) ، البؤري استقرار النظام ( الآسيوي ) و دقة التركيز ( closeloop ) وغيرها من المهام ، لضمان أن في نقاط زمنية مختلفة يمكن الحصول على صورة واضحة ، وتحسين جودة الصورة ودقة البيانات .

10 - الاستفادة من الرصد عن بعد : إذا كان الجهاز لديه وظيفة الرصد عن بعد ، يمكن استخدام هذه الوظيفة في الوقت الحقيقي رصد التقدم المحرز في التجربة ، والعثور على حل المشكلة في الوقت المناسب ، وتحسين كفاءة التجربة و نسبة النجاح .