أنواع مختلفة من الخلايا لديها متطلبات مختلفة عن ظروف ثقافة ، لذلك نحن بحاجة إلى اختيار المناسب 87050 خلية ثقافة الأنابيب . على سبيل المثال ، التصاق الخلايا تحتاج إلى اختيار جيد نفاذية الهواء ، في حين أن تعليق الخلايا يمكن أن تختار أفضل الختم ؛ متطلبات مختلفة من التجارب تختلف في المواصفات ، المواد ، نوع الغطاء ، الخ . ولذلك ، ينبغي أن تؤخذ في الاعتبار عند اختيار التجربة .

خطوات تحديد 87050 خلية ثقافة أنبوب تشمل أساسا الجوانب التالية :

1 - المرحلة التحضيرية

- اختيار المناسب زراعة الأنابيب : اختيار الحجم المناسب ونوع من زراعة الخلايا الأنابيب وفقا لمتطلبات التجربة ، مثل أنابيب الطرد المركزي المشتركة ، وزجاجات زراعة الخلايا ، الخ .

- التنظيف والتعقيم : تأكد من أن أنابيب الثقافة نظيفة وخالية من التلوث ، ويمكن أن تكون درجة حرارة عالية وضغط التعقيم أو التعقيم الحراري الجاف .

- إعداد الكواشف : بما في ذلك خلية متوسطة ( يجب أن يسخن إلى درجة حرارة مناسبة ، وعادة ما يتم اختيار جزء من متوسط التسخين لتوفير الوقت وتجنب تدهور البروتين ) ، التربسين ( المستخدمة في هضم الخلايا ) ، المصل ( توفير المواد الغذائية اللازمة لنمو الخلايا ) .

2 - تلقيح الخلايا

- تعداد الخلايا : إذا كان من الضروري التحكم بدقة في كمية الخلايا التي تم تلقيحها ، يجب إجراء تعداد الخلايا أولاً ، وذلك باستخدام لوحة العد الخلوي أو جهاز عد الخلايا الآلي لتحديد كثافة تعليق الخلية .

- تلقيح الخلايا : نقل كمية مناسبة من تعليق خلية في أنبوب الثقافة ، يهز بلطف حتى أن الخلايا موزعة بالتساوي .

3 - عملية التدريب

- توضع في حاضنة : توضع في حاضنة الخلايا أنبوبة تلقيح الخلايا ، وتحدد درجة الحرارة المناسبة ( 37 درجة مئوية عادة ) ، والرطوبة ( 40-60 عادة ) ، وتركيز ثاني أكسيد الكربون ( 5 عادة ) .

- المراقبة الدورية : مراقبة نمو الخلايا بانتظام كل يوم ، بما في ذلك مورفولوجيا الخلايا ، التصاق ، والتلوث ، الخ . ويمكن إجراء فحص أكثر تفصيلا من خلال الملاحظة المباشرة بالعين المجردة أو باستخدام المجهر .

4 - معالجة الخلايا وجمعها

- تغيير وسائل الإعلام : تغيير وسائل الإعلام الطازجة بانتظام لتوفير التغذية الكافية وإزالة الأيضات والخلايا الميتة وفقا لنمو الخلايا والاحتياجات التجريبية .

- مرور : عندما تكون الخلية كاملة إلى كثافة معينة ( عادة 70-80 درجة الانصهار ) ، مرور مطلوب . التربسين يستخدم لهضم الخلايا ، مما تسبب في أنها تسقط من الجزء السفلي من أنبوب الثقافة ، ثم إضافة جديدة متوسطة الثقافة لإنهاء عملية الهضم .

- جمع الخلايا : في حالة إجراء مزيد من التحليلات أو التجارب على الخلايا ، يمكن استخدام أجهزة الطرد المركزي لترسب الخلايا ، ثم يتم التخلص من طاف ثم يتم جمع الخلايا لترسب .