-
البريد الإلكتروني
dawei.zhao@aichrom.com
-
الهاتف
15210979260
-
العنوان
هايديان ، بكين تشونغ قوان تسون شمال 2 على 1
Ningbo Aichun Biotechnology Co., Ltd
العملية الأساسية نظام تنقية البروتين
التاريخ:2025-09-21اقرأ:2
تنقية البروتين هو خطوة هامة في دراسة علم الأحياء والكيمياء الحيوية ، التي تهدف إلى عزل وتنقية البروتين محددة من عينة بيولوجية معقدة لمزيد من تحليل هيكلها ووظيفتها والتفاعل . عملية تنقية البروتين عادة ما ينطوي على العديد من الخطوات ، بما في ذلك تجزئة الخلية ، الطرد المركزي ، والترشيح ، اللوني وغيرها من الوسائل التقنية ، جنبا إلى جنب مع مختلف مبادئ وأساليب الفصل ، من أجل تحقيق كفاءة عالية في فصل وتنقية البروتين المستهدف .
الخطوات الأساسية لتنقية البروتين :
1 - إعداد العينات
استخراج البروتين الكلي من الخلايا أو الأنسجة . هذه الخطوة عادة ما ينطوي على كسر الخلية ، الطرد المركزي ، وإزالة بقايا الخلية . طرق كسر الخلية المشتركة تشمل بالموجات فوق الصوتية ، وتجميد والذوبان والكيميائية تكسير .
2 - الفصل الأولي والتكثيف
البروتين المستخرج من عينات تحتوي على عدد كبير من المكونات الخلوية الأخرى ، مثل الأحماض النووية ، والدهون ، وهلم جرا . من خلال الطرد المركزي ، هطول الأمطار ، وما إلى ذلك ، لا لزوم لها من الشوائب يمكن إزالتها ، و استخراج البروتين النقي نسبيا يمكن الحصول عليها .
3 - الفصل اللوني
هذه الخطوة هي أهم خطوة في تنقية البروتين . التقنيات الكروماتوجرافى المشتركة هي :
- التبادل الأيوني اللوني : فصل على أساس الاختلافات في تهمة من البروتين .
- هلام اللوني الترشيح : استخدام الاختلافات في الحجم الجزيئي للبروتين لعزل .
- كروماتوجرافيا الألفة : عزل البروتينات المستهدفة على أساس تقارب البروتينات مع بعض يغاندس محددة .
- عكس المرحلة الكروماتوجرافى : فصل على أساس hydrophobicity من البروتين .
4 - الاختبار والتحقق
في عملية تنقية البروتين ، فإنه يحتاج إلى اختبار مستمر للتحقق من فعالية تنقية . طرق الكشف الشائعة تشمل صفحة الحزب الديمقراطي الصربي الكهربائي Westernblot、 تحليل الطيف الكتلي .
نظام تنقية البروتينتكوين
1 . جهاز استخراج البروتين : تستخدم لسحق الخلايا أو الأنسجة ، واستخراج البروتين منها . وعادة ما تكون مجهزة محطم ، الطرد المركزي ، فلتر ، وغيرها من المعدات .
2 - معدات الكروماتوغرافي : العمود الكروماتوغرافي ، ومضخة ، مقياس الجريان ، موزع ، وما إلى ذلك تشكل نظام الكروماتوغرافي لفصل وتنقية البروتين المستهدف .
3 . أدوات الاختبار : مثل الأشعة فوق البنفسجية فيس الإجار ، للكشف عن تركيز البروتين . أو في الوقت الحقيقي رصد عملية تنقية بواسطة مطياف الكتلة ، اللوني السائل ، الخ .
المقالة الأخيرة:ما هي خصائص تنقية البروتين ؟
المقالة التالية:اختيار واستخدام اقتراح تنقية البروتين