عندما كولاي هو مثقف في خزان التخمير ، التخمير محددة متوسطة تستخدم عادة ، والتي هي الأمثل وفقا لمتطلبات النمو و الغرض من الإنتاج . وفيما يلي بعض من الأكثر استخداما وسائل الإعلام التخمير وصياغتها : كولاي تستخدم عادة وسائل الإعلام التخمير وتشمل أساسا ما يلي :

1 . رطل متوسطة ( ليسوجين روث )

رطل متوسطة الثقافة هي واحدة من الأكثر استخداما على نطاق واسع في وسائل الإعلام ثقافة الإشريكية القولونية .

المكونات الرئيسية :

م .والتريبتون : 10 غ / ل

م .خلاصة الخميرة : 5 غ / ل

م .كلوريد الصوديوم ( كلوريد الصوديوم ) : 10 غ / ل

سمات :

م .التغذية الغنية ، ومناسبة لسرعة نمو كولاي .

م .أجار يمكن أن تضاف إلى الثقافة المتوسطة .

2 . السل متوسطة

السل متوسطة تحتوي على المزيد من المواد الغذائية من رطل متوسطة ، لذلك هو مناسبة لأنّ عال - كثافة التخمير .

المكونات الرئيسية :

م .والتريبتون : 12 غ / ل

م .خلاصة الخميرة : 24 غ / ل

م .الجليسرين : 4 مل / لتر

م .هيدروجين فوسفات البوتاسيوم ( kh2po4 ) : 12.54 غ / ل

م .هيدروجين فوسفات البوتاسيوم ( k2h2po4 ) : 8.56 غ / ل

م .كلوريد الأمونيوم ( nh4cl ) : 3-4 غ / ل

سمات :

م .هذا الاختراع يوفر أعلى المواد الغذائية التي هي مناسبة عالية الكثافة خلية ثقافة .

م .تستخدم عادة في التعبير عن البروتين والإنتاج الضخم .

3 . سوب متوسطة :

فائدة نموذج مناسبة لأنّ التعبير عن البروتين في القولونية ، يمكن أن تزيد من إنتاج البروتين ، ويمكن أن تستخدم أيضا في إعداد شركة نفط الجنوب متوسطة الثقافة .

المكونات الرئيسية :

م .2 ٪ ببتون

م .0.5 ٪ خلاصة الخميرة

م .10 ملم NaCl

م .2.5 ملم KCl

م .10 ملم MgCl2

م .10 ملم MgSO4

م .pH 7.5

سمات :

م .تكوين أكثر تعقيدا ، والتغذية الغنية ، وارتفاع محتوى النيتروجين ، والتي هي مناسبة لعلم الأحياء الجزيئي التجربة .

4 . شركة نفط الجنوب متوسطة :
وهي تستخدم أساسا في إعداد وتحويل الخلايا المختصة من الإشريكية القولونية ، ويمكن تحسين كفاءة التحويل ، ويمكن أن تستخدم أيضا في التعبير عن البروتين .

المكونات الرئيسية :

م .2 ٪ ببتون

م .0.5 ٪ خلاصة الخميرة

م .10 ملم NaCl

م .2.5 ملم KCl

م .10 ملم MgCl2

م .10 ملم MgSO4

م .20 ملم مد الجلوكوز

م .pH 7.5

سمات :

م .على أساس سوب متوسطة ، الجلوكوز المضافة ، والتي يمكن أن توفر مصدر الكربون مباشرة لصالح نمو كولاي .

5 - M9 متوسطة

M9 متوسطة هي واحدة من وسائل الإعلام الأساسية التي تستخدم عادة في بعض الاحتياجات التجريبية ، مثل زراعة سلالات معيبة .

المكونات الرئيسية :

م .葡萄糖 (الجلوكوز): 4 g / L

م .كلوريد الأمونيوم ( nh4cl ) : 1 غ / ل

م .كلوريد الصوديوم ( كلوريد الصوديوم ) : 0.5 غ / ل

م .هيدروجين فوسفات البوتاسيوم ( kh2po4 ) : 3G / L

م .هيدروجين فوسفات الصوديوم ( na2h2po4 ) : 6.78 غ / ل

م .كبريتات المغنيسيوم ( mgso4 ) : 0.241 غ / ل

م .كلوريد الكالسيوم ( كلوريد الكالسيوم ) : 0.011 غ / ل

سمات :

م .المكونات الغذائية هي بسيطة نسبيا ، وغالبا ما تستخدم في البحوث الأساسية أو التجارب التي تتطلب رقابة صارمة على الظروف الغذائية .

6.2xyt متوسطة

2xyt متوسطة هي متنوعة من رطل متوسطة ، والتي تحتوي على أعلى من المواد الغذائية و هي مناسبة لارتفاع كثافة الثقافة .

المكونات الرئيسية :

م .ببتون : 16 غ / ل

م .خلاصة الخميرة : 10 غ / ل

م .كلوريد الصوديوم ( كلوريد الصوديوم ) : 5 غ / ل

سمات :

م .هو مناسبة لأنّ عال - كثافة كولاي الثقافة .

الملحق

أثناء التخمير من كولاي ، قد تحتاج أيضا إلى إضافة المكملات الغذائية التالية :

م .المضادات الحيوية : تستخدم في اختيار سلالات مقاومة .

م .محفز ، مثل IPTG ، يستخدم للحث على التعبير عن البروتينات المؤتلف .

م .العناصر النزرة والفيتامينات الحلول : تستخدم لدعم نمو الخلايا .

في عملية التخمير ، صيغة وشروط متوسطة ( مثل درجة الحموضة ، درجة الحرارة ، الأوكسجين المذاب ، وما إلى ذلك ) تحتاج إلى تعديل على أساس تجريبي محدد الغرض ومتطلبات الإنتاج . على سبيل المثال : إذا كان ارتفاع كثافة التخمير ، تحتاج إلى زيادة كمية من كبريتات المغنيسيوم ، إضافة إلى إضافة مسحوق الخميرة المناسبة يمكن أن تزيد من فترة التخمير ، إضافة كبريتات الأمونيوم يمكن أن تزيد من تركيز البكتيريا . عملية التخمير يجب أن تتم تحت ظروف معقمة صارمة ، كل معلمة من عملية التخمير يجب رصدها لضمان تحقيق النتائج المرجوة .

عملية تطوير عملية التخمير القولونية عادة ما تشمل الخطوات الرئيسية التالية :

1 . بناء سلالات :

أولا ، يجب اختيار سلالة جيدة ، بما في ذلك الهندسة الوراثية الطريق تصميم سلالة التحول والفرز ، تهز قارورة الظروف لاستكشاف .

2 . تحسين وسائل الإعلام :

متوسطة الثقافة هي جزء مهم من عملية التخمير من الإشريكية القولونية . من الضروري تعديل صيغة متوسطة الثقافة وفقا لمختلف سلالات ومتطلبات المنتج ، معرفة مكونات متوسطة الثقافة ، يمكن أن تحمل على دو الفرز ، المكونات الرئيسية بما في ذلك الكربون والنيتروجين المصدر ، ملح غير عضوي ، وعوامل النمو ، وما إلى ذلك مطابقة نسبة .

3 . المعلمات عملية التحسين والتحكم :

درجة الحرارة : درجة الحرارة المثلى لنمو كولاي هو عادة 37 ℃ ، ولكن يمكن تعديلها حسب الغرض من التخمير و سلالة مميزة .

الرقم الهيدروجيني : الرقم الهيدروجيني الأمثل لنمو كولاي هو 7 ± 0.2 . قيمة الرقم الهيدروجيني من التخمير المصطنع يجب الحفاظ عليها من خلال حمض قاعدة التغذية الاستراتيجية .

الأكسجين المذاب ( لا ) : تركيز الأوكسجين المذاب الحرجة مجموعة من 20 ٪ ~ 30 ٪ . نقص الأكسجين المذاب يمكن أن يؤدي إلى تراكم حمض الخليك ، مما يؤثر على نمو البكتيريا . الإفراط في الأوكسجين المذاب قد يؤدي إلى التسمم بالأكسجين . ولذلك ، من الضروري السيطرة على مستوى الأوكسجين المذاب من خلال ضبط سرعة التحريك ، والتهوية وغيرها من المعالم .

التغذية الاستراتيجية : اختيار التغذية دفعة التخمير لتحقيق كثافة عالية من الإشريكية القولونية التخمير والحصول على المزيد من الكتلة الحيوية . استهلاك المواد الغذائية في التخمير المصطنع يجب رصدها في الوقت الحقيقي في عملية التغذية ، تغذية التكنولوجيا المتقدمة ، نوع التغذية ، تغذية الوقت وكمية التغذية مصممون .

في عملية التخمير ، برامج مماثلة مثل minitab أو أحزاب اللقاء المشترك يمكن أن تستخدم في تصميم دو طريقة لتسريع العملية التجريبية ، والعثور على أفضل وأكثر قوة المعلمات العملية .