واحدأنبوب الطرد المركزي الفائقالطرد المركزي المعلمة الأمثل

السرعة والوقت

الطرد المركزي الأولية تشير إلى أن تبدأ مع 70 ٪ من السرعة الموصى بها ( على سبيل المثال ، 3000 × ز الطرد المركزي لمدة 10 دقائق ) ، ثم ضبط سرعة التدفق تدريجيا إلى 4000 × ز ، ولكن ليس أكثر من غشاء الترشيح التسامح الحد .

عادة وقت المعالجة هو 10-30 دقيقة ، اعتمادا على الوزن الجزيئي ( MWCO ) و حجم العينة .

التحكم في درجة الحرارة

الطرد المركزي يجب أن يكون precooled إلى 4 ℃ للحد من امتصاص الحرارة لمسخ . . . . . . . انخفاض درجة حرارة البيئة يمكن أن يطيل عمر خدمة الغشاء ، ولكن تركيز الوقت قد تكون طويلة .

التسارع والتوازن

الطرد المركزي التسارع إلى أدنى حد ممكن ، مما يقلل من الضغط على الغشاء .

فائدة نموذج يضمن أن يقترن أنبوب الترشيح الفائق هو متوازن مع مركز الثقل ، و وضع الكلمات و اتجاه فلتر عنصر متسقة ، وبالتالي تجنب الاهتزاز أو الضرر في عملية الطرد المركزي .

استراتيجية تعزيز الانتعاش

غشاء الترشيح واختيار المعالجة

غشاء الترشيح الفائق MWCO هو 2-3 مرات أصغر من الهدف جزيء . على سبيل المثال ، عندما يكون الوزن الجزيئي للبروتين الهدف هو 35kda ، الفائق أنبوب مع الوزن الجزيئي 10kda اعتراض مختارة .

غشاء الترشيح الفائق التي تم شراؤها حديثا من أنابيب الطرد المركزي يحتوي على كمية صغيرة من الجلسرين ، يجب أن تكون غارقة في المياه النقية أو العازلة قبل استخدامها ووضعها في الثلاجة لمدة 10 دقائق قبل التبريد . بعد صب الماء النقي ، ثم وضع أنبوب الترشيح الفائق على الجليد قبل التبريد لمدة 2-5 دقائق .

تجهيز العينات

تم تصفية العينة مع 0.22 ميكرون غشاء الترشيح في وقت مبكر لتجنب انسداد غشاء الترشيح الفائق من الجسيمات .

إضافة العينة ببطء إلى أنبوب الترشيح الفائق ، مستوى السائل لا يتجاوز الحد الأقصى . عند إضافة العينة ، ينبغي أن تكون العملية خفيفة الوزن ، وتجنب تدمير غشاء هيكل .

التركيز و عملية الاستخراج

توقف كل 5 دقائق في عملية الطرد المركزي ، واستخدام ماصة بلطف ضربة اعتراض طبقة لمنع تراكم الجزيئات على شكل تركيز الاستقطاب طبقة .

اعتراض حجم التحكم في حجم العينة الأصلية من 1 / 10 إلى 1 / 20 . تركيز عالية جدا متعددة يمكن أن يؤدي بسهولة إلى تراكم البروتين ، ويمكن أن تضاف في منتصف الطريق من خلال استبدال العازلة الفائق ، والتركيز على مراحل .

لزوجة العينة ( على سبيل المثال ، تحتوي على الجلسرين أو السكروز ) ، تحتاج إلى خفض سرعة دوران 10 ٪ - 20 ٪ ، وإطالة وقت الطرد المركزي .

عملية الاسترداد

بعد الطرد المركزي ، الجزيئات الكبيرة تبقى في الطبقة العليا ، والجزيئات الصغيرة والمذيبات تدخل الطبقة السفلى من خلال الغشاء . الترشيح الخارجي هو جزيء صغير من المواد والمذيبات . السائل في الأنبوب الداخلي هو جزيء مادة .

إذا كان جزيء مادة تحتاج إلى جمع ، ثم تأخذ خارج أنبوب آخر ، داخل أنبوب مقلوب 1000 * ز الطرد المركزي 1-2 دقيقة .

المشاكل المشتركة والحلول

تسرب أو عدم الكشف عن البروتين

الأسباب : سوء اختيار مرشح غشاء الطرد المركزي المعلمات غير مناسب ، وانخفاض تركيز العينة الأولية ، وهلم جرا .

الحل : إعادة اختيار مناسب MWCO غشاء الترشيح ، ضبط الطرد المركزي المعلمات لضمان تركيز العينة الأولية أكثر من 25 ميكروغرام / مل .

انسداد الغشاء أو بطء تدفق

السبب : الكثير من الجسيمات في العينة ، غشاء الترشيح التلوث .

الحل : نموذج الترشيح في وقت مبكر ، وتنظيف العادية أو استبدال غشاء فلتر . تم العثور على انسداد الغشاء ، غمر مع 0.1m هيدروكسيد الصوديوم لمدة 1 ساعة ، ثم شطف مع الماء النقي ثلاث مرات .

انخفاض معدل الاسترداد

السبب : غشاء الامتزاز ، عملية غير سليمة ، وهلم جرا .

الحل : إغلاق غشاء الترشيح مع 1 ٪ جيش صرب البوسنة لمدة 30 دقيقة في وقت مبكر ، والحد من امتصاص غير محددة . عند التشغيل ، وإيلاء الاهتمام إلى ليونة وتجنب تدمير غشاء هيكل .

هطول الأمطار بعد الترشيح

السبب : تركيز البروتين عالية جدا ، عازلة غير مناسب ، وهلم جرا .

الحل : استخدام عدة أنابيب الترشيح الفائق في وقت واحد ، والحد من التركيز . تغيير مخازن مختلفة حتى البروتين لا يعجل . من أجل هطول الأمطار ، 8M اليوريا يمكن استخدامها مرة أخرى بعد حل الطرد المركزي .

رابعاً - الصيانة والصيانة

تنظيف وتعقيم

يمكن التخلص منها أنابيب الطرد المركزي الفائق مباشرة التخلص منها بعد الاستخدام .

إذا كان الاستخدام المتكرر ، استخدام أنبوب الترشيح الفائق هو غسلها مرارا وتكرارا مع الماء النقي لمدة 5 مرات ، ثم غارقة في 0.1m هيدروكسيد الصوديوم لمدة 1-2 ساعة ، ثم غسلها مع 20 ٪ من الإيثانول ، وغسلها مع المياه النقية أو العازلة لمدة 3 مرات . الاستخدام المتكرر الفائق الأنابيب لا ينصح أكثر من 5 مرات .

الحفاظ على المدى الطويل

التخزين على المدى القصير : نقع مع 0.1m هيدروكسيد الصوديوم لمدة 1-2 ساعة ، وتنظيف المياه النقية 3 مرات ، ثم نقع مع 75 ٪ من الإيثانول ، تأكد من الحفاظ على غشاء الترشيح الرطب ، لا تنمو البكتيريا .

الحفاظ على المدى الطويل : نقع مع 0.1m هيدروكسيد الصوديوم لمدة 1-2 ساعة ، وتنظيف المياه النقية 3 مرات ، ثم نقع مع 20 ٪ من الإيثانول ، تأكد من الحفاظ على غشاء الترشيح الرطب ، لا تنمو البكتيريا .