مختلطة تبادل الأيونات الموجبة العمود يجمع بين تبادل الأيونات الموجبة و عكس المرحلة الكروماتوغرافي الاحتفاظ المزدوج وسائط .
إعداد قبل العملية
اختيار العمود
اختيار نوع مختلط الأعمدة حسب خصائص الهدف من المركبات ( على سبيل المثال ، بكا قيمة قطبية ) . على سبيل المثال ، حمض السلفونيك مجموعة قوية العمود هو مناسبة للاستخدام في pka2-10 المركبات الأساسية ( مثل الأمينات ، السلفوناميدات ) .
استقرار الركازة ( على سبيل المثال ، الستايرين كوبوليمر دافنيلبنزين ) و مجموعة وظيفية ( على سبيل المثال ، حمض السلفونيك المجموعة ) هو التأكد من أن لا تتحلل في درجة الحموضة تتراوح من 0 إلى 14 في المذيبات العضوية .
معدات التفتيش
تحقق ما إذا كان نظام الكروماتوغرافي ( على سبيل المثال ، هبلك ) سرعة التدفق ، مجموعة الضغط لتتناسب مع متطلبات العمود ( على سبيل المثال ، الفولاذ المقاوم للصدأ العمود 4500 رطل كحد أقصى ، عمود الزجاج 3000psi ) .
تثبيت عمود الحماية لمنع التلوث أو انسداد عمود التحليل . . . . . . .
إعداد الكواشف
إعداد eluent ( مثل حمض الميثانول الحل ، وحامض الستريك العازلة ) و degasification والترشيح ( 0.2-0.5
تفعيل المذيبات ( مثل الميثانول والماء ) و eluent ( مثل خليط يحتوي على المذيبات العضوية العازلة الملح ) مستعدون .
ثانياً - الخطوات العملية
تفعيل العمود
الهدف : إزالة الشوائب ، وجعل مرحلة ثابتة تماما تورم ، وضمان كفاءة العمود .
طرق
الميثانول ( 3-5 مرات حجم العمود ، سرعة التدفق 1-5 مل / دقيقة ) و الماء ( نفس حجم وسرعة التدفق ) كانت تستخدم لتفعيل العمود بدوره .
إذا كان العمود لا تستخدم لفترة طويلة ، تحتاج إلى شطف مع الكثير من الماء أولا ، ثم شطف مع الميثانول ، وأخيرا تخزينها في محلول مائي يحتوي على 50 ٪ من الميثانول .
عينة عينة
الهدف : الجمع بين الهدف مع تحديد الشوائب تتدفق مع المرحلة المحمول .
طرق
عينة الحل يمر ببطء من خلال العمود في 0.5-2ml / min معدل التدفق ، وضمان الاتصال موحدة ثابتة المرحلة .
إذا كان تركيز العينة عالية جدا ، يجب أن تكون مخففة لتجنب تجاوز قدرة تحمل العمود .
eluent إزالة النجاسة
الهدف : إزالة الشوائب التي تختلف عن الهدف ولكن كثف على العمود .
طرق
إن eluent تحتوي على المذيبات العضوية العازلة الملح ( على سبيل المثال ، 5 ٪ من الميثانول مائي ) كان يستخدم 3-5 مرات حجم السرير ، ومعدل التدفق 1-3 مل / دقيقة .
من أجل تجنب أن يكون الهدف eluent ، نوع ونسبة eluent يجب أن يكون الأمثل .
الهدف eluent
الهدف : تدمير التفاعل بين الهدف و مرحلة ثابتة ، وجمع eluent . . . . . . .
طرق
الحل المختلط مع تركيز عال من حمض / قاعدة المذيبات العضوية ( مثل حمض الميثانول الحل ) كان يستخدم eluent ، الجرعة 2-4 مرات حجم العمود السرير ، ومعدل التدفق 1-3 مل / دقيقة .
جمع eluent لتجنب فقدان الهدف بسبب الإفراط في eluent . . . . . . .
عمود التجديد والحفاظ
الهدف : استعادة الدولة الأولي من العمود ، وإطالة أمد الحياة .
طرق
العمود هو غسلها مع كمية كبيرة من المياه ، ثم شطف مع الميثانول ، وأخيرا تخزينها في محلول مائي يحتوي على 50 ٪ من الميثانول ، مختومة في درجة حرارة مناسبة .
إذا كان العمود ملوثة ، يمكن تنظيفها مع 1mnh لا كحولالأيسوبروبيل أو غيرها من الحلول الخاصة .
ثالثاً - الاعتبارات الرئيسية
التحكم في التدفق
تجنب سرعة عالية جدا مما يؤدي إلى انخفاض كفاءة العمود أو فقدان مرحلة ثابتة ، وبطء سرعة التدفق يطيل وقت التحليل .
عند ضبط سرعة التدفق ، يجب أن تتغير تدريجيا لمنع اضطراب ملء السرير .
درجة الحموضة ودرجة الحرارة الحد
تجنب استخدام درجة الحموضة القصوى ( على سبيل المثال ، الرقم الهيدروجيني > 6.5 المذيبات القلوية أو الحموضة أقل من 2.5 المذيبات الحمضية ) تلف الركيزة السيليكون العمود .
فمن المستحسن أن العمود يمكن استخدامها في درجة حرارة الغرفة أقل من 40 درجة مئوية ، وارتفاع درجة الحرارة يمكن أن تقلل من الاستقرار .
اختيار eluent
تجنب استخدام العازلة التي تحتوي على حمض الصفصاف وغيرها من منتجات التحلل ، لتجنب تغيير خصائص المرحلة الثابتة .
eluent يجب أن تكون طازجة ، والتي يمكن تجنب التلوث الميكروبي أو تغيير القوة الأيونية التي تؤثر على فصل تأثير .
عينة المعالجة
تصفية عينة لإزالة الجسيمات الشوائب ومنع انسداد العمود .
إذا كان هناك فرق كبير في قطبية بين العينة و المرحلة المحمول ، derivatization أو تمييع ينبغي القيام به .
تطبيق المثال المشهد
سلامة الأغذية : الكشف عن الكشف عن الميلامين في الحليب ( المركبات الأساسية ) ، وذلك باستخدام مزيج من ضعف تبادل الأيونات الموجبة عكس المرحلة العمود ، من خلال تبادل الأيونات الموجبة عكس المرحلة الإبقاء على الوضع المزدوج لتحقيق كفاءة الفصل .
تحليل المخدرات : عند تحليل الأدوية الأساسية وعناصرها في الدم ، ونحن استخدام مزدوج الاحتفاظ آلية مختلطة قوية عكس المرحلة تبادل الأيونات الموجبة العمود لتحسين كفاءة الفصل والحساسية .
الرصد البيئي : عندما يتم الكشف عن الملوثات القلوية ( مثل الأمينات ) في المياه ، وسرعة عملية الاستخراج والتحليل الكمي الهدف يتحقق من خلال الاستفادة المثلى من عملية الاستخراج .