من خلال الجمع بين التصوير الضوئي مع تحليل البرمجيات ، هلام نظام التصوير يمكن تحقيق دقة تحديد الوزن الجزيئي وتركيز التحليل .
دقة تحديد الوزن الجزيئي المبادئ والخطوات
بناء منحنى القياسية
في هذا النظام ، dnamarker العصابات مع الوزن الجزيئي معروفة تستخدم كمرجع ، وموقعها هو المسمى من قبل البرنامج و تركيب منحنى الوزن الجزيئي الهجرة بالجو يتم إنشاؤها . هذا المنحنى على أساس العلاقة الخطية بين الوزن الجزيئي والتنقل في الكهربائي ، وبالتالي ضمان دقة حساب الوزن الجزيئي غير معروف العصابات . على سبيل المثال ، بعد الوزن الجزيئي ماركر العصابات ( على سبيل المثال ، 100bp 500bp , و 1000bp ) على فيلم الحمض النووي هو المسمى ، منحنى المناسب تلقائيا من قبل النظام ، والتي يمكن استخدامها لحساب الوزن الجزيئي غير معروف العصابات .
حساب الوزن الجزيئي الشريط غير معروف
هلام الاستشراب وضعت في نظام التصوير ، مضان متحمس من الأشعة فوق البنفسجية أو مرئية مصدر الضوء ( على سبيل المثال ، إب تلطيخ ) . بعد التقاط الصور من قبل البرنامج ، الوزن الجزيئي حسبت على أساس موقف غير معروف من الفرقة الهجرة في هلام جنبا إلى جنب مع معيار المنحنى . هذا الأسلوب هو أكثر دقة من تقدير بالعين المجردة ، و الخطأ هو أقل من ± 5 ٪ .
طريقة دقيقة لتحديد تركيز
كثافة المعايرة والمقارنة
أولا ، نظام معايرة الشريط القياسية مع تركيز معروف ( على سبيل المثال ، محتوى الحمض النووي من الشريط على فيلم الحمض النووي ) ، ثم اضغط على الشريط غير معروف من خلال البرنامج ، مقارنة مع الفرق في كثافة الشريط القياسية ، وحساب تركيز العينة غير معروف . على سبيل المثال ، إذا كان معيار كثافة الشريط هو 100 وحدة ، المقابلة تركيز 50 نانوغرام / μ ل ، غير معروف كثافة الشريط هو 50 وحدة ، ثم تركيز حوالي 25 نانوغرام / μ ل .
الكثافة الضوئية علاقة خطية
امتصاص الضوء من العينة خطيا مع التركيز أو الكتلة . من خلال قياس كثافة الضوء ( مقياس الرمادية أو كثافة مضان ) من الشريط ، جنبا إلى جنب مع منحنى القياسية أو بيانات العينة المعروفة ، المجهول تركيز العينة يمكن حسابها . هذا الأسلوب هو مناسبة لتحديد تركيز الحمض النووي الريبي والبروتين الهلاميات المائية ( مثل صفحة هلام ) .
ضمان التكنولوجيا الرئيسية
النظام البصري الأمثل
الأشعة فوق البنفسجية مصدر الضوء أو الضوء الأبيض نقل مصدر الضوء المستخدمة لضمان توزيع الضوء بالتساوي ، والحد من تأثير كثافة الضوء متفاوتة على النتائج . عالية الدقة اتفاقية مكافحة التصحر الكاميرا الرقمية أو التقاط الصور ، جنبا إلى جنب مع تصميم مربع الظلام التدريع مصدر الضوء الخارجي التدخل ، وتحسين جودة الصورة .
تحليل البرمجيات وظيفة
البرنامج يدعم خلفية الطرح ، قطاع غزة تجزئة ، كثافة المسح الضوئي ، وما إلى ذلك ، يمكن أن تولد منحنى المسح الطولي والتكامل لتحقيق دقة القياس الكمي . على سبيل المثال ، في الكمية PCR ، البرنامج يمكن حساب نسبة كل قطاع إلى مجموع قطاع غزة ، في حين أن كثافة المسح الضوئي يمكن أن تولد منحنى التوزيع الطولي من الشريط الرمادي القيمة .
رابعاً - تطبيق السيناريوهات والمزايا
علم الأحياء الجزيئي : دقة تحديد الوزن الجزيئي الحمض النووي / الجيش الملكي النيبالي ، مساعد استنساخ الجينات وتسلسلها .
هندسة البروتين : التحليل الكمي نسبة البروتين عن المنتج ، وتحسين عملية التخمير .
تطوير الأدوية : تقييم نقاء الدواء من خلال قياس تركيز لضمان مراقبة الجودة .
من خلال عملية موحدة ، والتكنولوجيا المتقدمة ، هذا النظام يدرك ضعف دقة تحديد الوزن الجزيئي والتركيز ، ويوفر بيانات موثوق بها لدعم بحوث علوم الحياة .