1、إستعمال :

الهدف من دراسة تأثير تنقية Ochratoxin ألف ( Ochratoxin ألف ) في عينات من الأدوية الصينية التقليدية ( الطب الصيني التقليدي ) .

2、نظرة عامة :

Ochratoxin أ ( OTA ) هو المستقلب السام من بعض سلالات الرشاشيات و Penicillium . Ochratoxin أ ( OTA ) هو نوع من السموم الفطرية التي يمكن أن تعزز الكلى والكبد سمية .

3、مبدأ

قاعدة التصميم هو مستضد الضد رد فعل الأجسام المضادة التي ترتبط في العمود ، بعد استخراج وتصفية ، عينة يمر عبر Ochratoxin ألف immunoaffinitive العمود ببطء ، الذيفان الداخلي في immunoaffinitive العمود هو جنبا إلى جنب مع الأجسام المضادة ، ثم غسل immunoaffinitive العمود لإزالة المواد الأخرى غير الملزمة . Ochratoxin أ هو مزال مع الميثانول ثم حقنها في أداة تحليلية للكشف .

4、تكوين الحزمة :

كل مربع يحتوي على مواصفات مختلفة من Ochratoxin أ ايمنوافينيتي العمود 1 نسخة من التعليمات .

5、المواد المطلوبة ولكن لا تتوفر في المربع :

5-1 المعدات واللوازم

--- HPLC / LC-MS / MS

--- تعمل بالهواء المضغوط رف

--- مضخة الهواء

التوازن

--- عالية السرعة الخالط ( سرعة دوران ≥ 10 ، 000 / دقيقة ) أو هزاز

--- محطم

--- عينة تقسيم الشاشة

--- اسطوانة قياس : 100ml / 10ml

--- المحاقن : 20ml

--- ماصة أو ماصة : 1 مل

--- كأس متجانس ( أو 250 مل مع سدادة زجاجة مخروطية الشكل )

--- عينة زجاجة

-- قياس زجاجة

5-2 الكواشف

--- الميثانول ( CH₃OH ) : نقاء التحليلية لعملية الاستخراج / نقاء الكروماتوغرافي لعملية الاستخراج

--- كلوريد الصوديوم ( كلوريد الصوديوم ) : نقاء التحليلية

--- حمض الهيدروكلوريك ( حمض الهيدروكلوريك ) : نقاء التحليلية

--- هيدروكسيد الصوديوم ( هيدروكسيد الصوديوم ) : نقاء التحليلية

--- ثنائي الصوديوم فوسفات الهيدروجين ( نه₂بو₄) : التحليلية الصرفة

--- هيدروجين فوسفات البوتاسيوم ( خ )₂بو₄) : التحليلية الصرفة

--- ملعقة شاي : التحليلية الصرفة

توين - 20 ( ج )₅₈ح₁₁₄أ₂₆) : التحليلية الصرفة

ماء₂س ) : الماء المقطر أو منزوع الأيونات

6、ملاحظة :

--- قبل الاستخدام ، ايمنوافينيتي العمود يحتاج إلى العودة إلى درجة حرارة الغرفة ( 22-25 ℃ ) .

--- تقارب العمود 2 ～ 8 ℃ التخزين ، لا تجميد التخزين .

--- استخدام ايمنوافينيتي العمود في تاريخ انتهاء الصلاحية .

--- تفريغ السائل في تقارب العمود قبل إجراء عملية التحميل .

--- حجم العينة : يمكن زيادة أو نقصان حجم العينة حسب الحاجة ، وإيلاء الاهتمام إلى تغيير حجم استخراج وفقا لذلك .

--- حجم العمود : حجم العمود هو 200 نانوغرام ، عندما يكون محتوى السم في العينة التي سيتم الكشف عنها مقسوما على تخفيف مرات أعلى من حجم العمود ، حجم العينة يجب أن تخفض بشكل صحيح ، وإعادة الكشف عنها .

--- الرقم الهيدروجيني : الرقم الهيدروجيني من عينة الحل في تقارب العمود يجب أن يكون بين 6 و 8 ، إذا كان الانحراف عن هذا النطاق يتطلب استخدام حمض الهيدروكلوريك أو هيدروكسيد الصوديوم لضبط درجة الحموضة .

--- المذيبات في الجهاز يمكن القضاء على تأثير المذيبات المذيبات المرحلة المحمول .

--- Ochratoxin يمكن أن يسبب السرطان ، يجب ارتداء القفازات والأقنعة وغيرها من أدوات الحماية .

--- استخدام الحاويات القياسية الحل ينقع في محلول هيبوكلوريت الصوديوم ( 5 ٪ الخامس / الخامس ) بين عشية وضحاها .

7、إعداد حل الاختبار :

7-1 استخراج

70 ٪ من الميثانول - محلول مائي ( v-methanol : v-water = 70 : 30 ) : 700 مل من الميثانول ، إضافة الماء منزوع الأيونات حجم 1 لتر .

الفوسفات العازلة ( برنامج تلفزيوني )

8.00g كلوريد الصوديوم ، 1.20g هيدروجين فوسفات ثنائي الصوديوم ( أو 2.92g هيدروجين فوسفات ثنائي الصوديوم dodecahydrate ) ، 0.20g هيدروجين فوسفات البوتاسيوم ، 0.20g ملعقة شاي ، حل مع 900 مل من الماء ، حمض الهيدروكلوريك ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7 ± 0.1 ، إضافة الماء المخفف إلى 1000 مل .

الفوسفات توين العازلة ( pbst ) .

1 مل من برنامج تلفزيوني tween-20 مخففة إلى 1000 مل .

وعينة العلاجس

--- 3G ± 0.01g عينة ( العينة الصلبة يجب أن تكون سحقت ، 2mm عينة الشاشة ) ، 3G كلوريد الصوديوم في زجاجة متجانسة ، إضافة 60 مل من استخراج ( انظر 7-1 ) ؛

--- عالية السرعة التجانس ( ≥ 10 ، 000r / دقيقة ) لمدة 2 دقيقة .

--- الطرد المركزي 10min ( 8000r / min ) ؛

--- تأخذ 5 مل طاف ووضعها في 50 مل زجاجة قياس ، تمييع مع برنامج تلفزيوني عازلة حتى تخرج ، والخلط ، الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة ( 8000r / دقيقة ) ؛

--- أخذ 20 مل طاف وتنقيته من خلال تقارب المناعية العمود .

تخفيف مضاعفات : 10

9、إجراءات التشغيل :

9-1 عينة

--- إزالة عمود تقارب المناعي ، وانخفاض نهاية الحقنة مباشرة من خلال عمود تقارب

ربط المحاقن برميل مع تقارب العمود هو الانتهاء من وضع المحاقن برميل على الهواء التي تسيطر عليها عملية إصلاح الإطار .

--- بعد تفريغ السائل في تقارب العمود ، تأخذ عينة السائل في الخطوة 8 و حقن حقنة برميل .

--- تدفق السائل بمعدل 1-2 قطرات في الثانية .

9-2 غسل

--- إلى أن يجفّ سائل ;

- 10 مل من الماء ( انظر 7-3 ) كانت تستخدم لغسل ايمنوافينيتي العمود .

9-3 عملية الاستخراج

--- بعد أن يجف السائل ، إزالة الحقنة ، ضربة تجفيف السائل في تقارب العمود ، مزال مع 1.5 مل من الميثانول ، وجمع eluent في 2 مل زجاجة العينة ، تمييع مع الماء حتى الميزان ، مزيج متجانس .

--- بعد الترشيح مع 0.22 ميكرون microporous فلتر ، يتم نقلها إلى عينة زجاجة هبلك التحليل .

* استنزاف آخر السائل قبل كل عينة .

10、تفسير النتائج :

Ochratoxin أ = تركيز الكشف * تخفيف متعددة

وظروف التخزين وفترة الصلاحيةس

ظروف التخزين : 2 ~ 8 ℃ .

تاريخ انتهاء الصلاحية : هذا المنتج صالحة لمدة 18 شهرا .