العمود الكروماتوجرافى هو عنصر أساسي من عناصر التحليل الكروماتوغرافي ، أدائها يؤثر بشكل مباشر على كفاءة الفصل ودقة الكشف عن النتائج . صيانة معقولة يمكن أن يطيل عمر خدمة العمود الكروماتوجرافى ، وتجنب تدهور الأداء أو الضرر الناجم عن عملية غير سليمة . وفيما يلي مبادئ توجيهية مفصلة بشأن صيانة العمود الكروماتوجرافى ، بما في ذلك التركيب والاستخدام والتخزين والصيانة .

إعداد قبل التثبيت

1 - التفتيش البصري

- يجب فحص العمود الكروماتوجرافى الجديد قبل استخدامه للتأكد من سلامته وعدم وجود صدع أو خدش أو تسرب .

- التأكد من أن العمود المناسب هو المتطابقة مع الصك ، وتجنب تسرب أو تلف بسبب عدم تطابق الموضوع .

2 - المرحلة المحمول اختبار التوافق

- قبل الاستخدام ، شطف العمود الكروماتوجرافى مع المذيبات منخفضة اللزوجة ( مثل الميثانول أو الأسيتونيتريل ) لإزالة الشوائب المتبقية في عملية الإنتاج .

- اختبار التوافق بين مرحلة الجوالة و العمود الكروماتوجرافى وتجنب استخدام الأحماض القوية أو القلويات القوية أو المذيبات المسببة للتآكل ( مثل استخدام TFA بحذر ) .

3 - ملاءمة النظام

- التأكد من أن قيمة الضغط من العمود الكروماتوجرافى يطابق الضغط من جهاز النظام ، وتجنب انهيار العمود بسبب عملية الضغط الزائد .

- تسجيل نوع ومواصفات العمود الكروماتوجرافى ( مثل حجم الجسيمات ، حجم المسام ، C18 التغطية ، وما إلى ذلك ) ، وفقا صارمة مع الشركة المصنعة الموصى بها من شروط الاستخدام .

الصيانة في الاستخدام اليومي

1 - اختيار وإدارة المرحلة المتنقلة

- التحكم في درجة الحموضة : عكس المرحلة الكروماتوغرافي العمود ( على سبيل المثال C18 العمود ) ينطبق على درجة الحموضة تتراوح بين 2-8 ، والتي يمكن أن تلحق الضرر الركيزة السيليكون .

- نسبة المذيبات العضوية : تجنب التغيرات الحادة في نسبة المذيبات العضوية في مرحلة الجوالة ( مثل التحول المباشر من 100 ٪ من المياه إلى 100 ٪ من المذيبات العضوية ) ، يتطلب الانتقال التدرج لمنع تقلص أو توسيع العمود السرير .

- الترشيح و degasification : المرحلة المحمول يحتاج إلى أن يصفى من خلال غشاء الترشيح 0.22 ميكرون ، و degasification بالموجات فوق الصوتية ، وتجنب الجسيمات الدقيقة انسداد العمود السرير أو الكشف عن فقاعة تدخل .

2 . عينة المعالجة

- يجب أن يكون الطرد المركزي أو الترشيح ( 0.22 ميكرون غشاء الترشيح ) لإزالة الجسيمات العالقة أو هطول الأمطار .

- تجنب أخذ العينات مباشرة في تركيزات عالية من العينة ، تمييع في العمود مجموعة القدرات ( إشارة إلى حجم العينة المقدمة من الشركة المصنعة المعلمات ) .

- يقترح استخدام عمود حماية لعينات معقدة لاعتراض الشوائب وإطالة عمر العمود الرئيسي .

3 - التحكم في التدفق والضغط

- تعمل بدقة وفقا لسرعة التدفق الموصى بها من العمود ، وارتفاع سرعة التدفق يمكن أن يؤدي إلى ضغط كبير جدا من العمود ، وتسريع ارتداء التعبئة والتغليف .

- سرعة التدفق العادي عكس المرحلة العمود هو 0.5-2 مل / دقيقة ، و سرعة تدفق عالية الأداء اللوني السائل ( UHPLC ) العمود هو 0.1-0.5 مل / دقيقة .

- عندما يرتفع ضغط النظام فجأة ، توقف على الفور للتحقق من سبب ( مثل انسداد وصمة عار أو تلوث لوحة غربال ) .

4 . الشطف والتنظيف

- بعد كل استخدام ، شطف العمود الكروماتوجرافى 10-20 دقيقة مع الماء النقي أو المذيبات منخفضة اللزوجة ( مثل الميثانول ) ، وإزالة بقايا العينة أو الملح .

- بعد استخدام على المدى الطويل ، يمكن إجراء عملية تجديد العمود ( مثل الارتداد ، وارتفاع درجة حرارة التنظيف أو التجديد الكيميائي ) ، واستعادة كفاءة العمود .

ثالثاً - التخزين والحفظ

1 . التخزين على المدى القصير ( أيام إلى أسابيع )

- عكس المرحلة العمود الكروماتوجرافى : الحفاظ على الميثانول مع الماء ( 1 : 1 ) أو الميثانول النقي ، وتجنب تكسير التعبئة بسبب التجفيف .

- العمود الكروماتوجرافى العادي : الحفاظ على الهكسين أو الكلوروفورم لمنع فشل امتصاص الماء .

- تخزين درجة الحرارة في درجة حرارة الغرفة ، وتجنب تجميد أو ارتفاع درجة حرارة البيئة .

2 . التخزين على المدى الطويل ( أكثر من شهر )

- إزالة العمود الكروماتوجرافى من الجهاز ، وختم كلا الطرفين لمنع التلوث .

- تخزينها في مكان بارد وجاف ، والتحقق من الختم بشكل دوري ، ومنع تبخر المذيبات مما تسبب في العمود السرير الجاف الكراك .

تجديد وإصلاح العمود

1 . عملية الارتداد

- مناسبة لأنّ عمود تأثير انخفاض ولكن ليس الفشل الكامل ، وإعادة ترتيب التعبئة من خلال backwashing لاستعادة العمود السرير التوحيد .

- سرعة الارتداد يجب أن يكون أقل من سرعة التدفق إلى الأمام ( على سبيل المثال ، 0.2 مل / دقيقة ) و التحكم في الوقت بين 10 و 30 دقيقة .

2 - التجديد الكيميائي

- السليكا هلام الركيزة العمود : يمكن أن تكون مغمورة في 10 ٪ الميثانول الحل وتنظيف بالموجات فوق الصوتية لإزالة الشوائب مسعور .

- عمود البوليمر : مقاومة قوية ، ويمكن غسلها وتجديدها مع تركيز عال من المذيبات العضوية ( مثل الأسيتونيتريل النقي ) .

3 . ارتفاع درجة الحرارة تجديد

- مناسبة لأنّ عال - درجة حرارة مقاومة العمود الكروماتوجرافى ( مثل عمود C18 ) ، وارتفاع درجة حرارة العمود إلى 50-60 ℃ ، وغسلها مع الميثانول ، حل الشوائب الذائبة للدهون كثف على حشو .

خامساً - المشاكل المشتركة والحلول

1 - ارتفاع ضغط العمود

- الأسباب : انسداد وصمة العار ، وتلوث لوحة غربال أو انهيار حشو .

- حل : عكس غسل وصمة عار ، واستبدال لوحة غربال أو تجديد العمود الكروماتوجرافى .

2 - توسيع أو سحب

- السبب : التعبئة الشيخوخة ، موقع نشط المتبقية أو موبايل المرحلة الحموضة غير لائق .

- حل : ضبط درجة الحموضة من المرحلة المحمول ، وتجديد العمود الكروماتوجرافى أو استبدال العمود الجديد .

الاحتفاظ الوقت الانجراف

- الأسباب : التغيرات في تكوين المرحلة المتنقلة ، وتقلب درجة حرارة العمود ، أو فشل جزء من الحشو .

- حل : التحقق من نسبة المرحلة المحمول ، وتثبيت درجة حرارة العمود ، وتجديد أو استبدال العمود إذا لزم الأمر .

سادساً - نقاط الاهتمام

1 - تجنب دخول فقاعة : فقاعة سوف تدمر العمود هيكل السرير ، مما يؤدي إلى زيادة الفجوة بين التعبئة والتغليف ، مما يؤثر على تأثير الانفصال .

2 . تعطيل غير متوافق المذيبات : مثل رباعي هيدرو الفوران ( THF ) قد حل سيليكون الركيزة ، استخدام الحذر .

3 . سجل سجل : تتبع استخدام مرات ، نوع العينة ، وصيانة وتشغيل العمود الكروماتوجرافى ، من السهل التنبؤ الحياة .