عيار المضادات الحيوية أداة قياس هو مفتاح المعدات المستخدمة في قياس تركيز المضادات الحيوية النشطة . العوامل الرئيسية التي تؤثر على نتائج القياس يتم تحليلها بشكل منهجي من جوانب أداء الصك ، عملية المعايير ، الظروف البيئية ، خصائص العينة و منهجية الاختيار .

عامل أداء الجهاز

1 . اختبار استقرار النظام

- تذبذب مصدر الضوء : تعتمد أجهزة الكشف البصري ( مثل turbidimetric أو fluorimetric ) على استقرار مصدر الضوء . الشيخوخة ، تذبذب التيار الكهربائي أو سوء تبديد الحرارة من مصباح زينون أو مصدر الضوء LED يمكن أن يؤدي إلى تغيير شدة الضوء ، والتي سوف تؤثر بشكل مباشر على دقة القياس من الامتصاصية أو مضان القيمة . على سبيل المثال ، 10 ٪ انخفاض كثافة الأشعة فوق البنفسجية مصدر الضوء قد يؤدي إلى أكثر من 5 ٪ من حساب قوة الانحراف .

- حساسية الكاشف : أجهزة الاستشعار الكهروضوئية ( مثل اتفاقية مكافحة التصحر أو PMT ) تتطلب استجابة خطية ، ومستوى الضوضاء الداكنة والحصول على الإعداد المعايرة الدورية . انخفاض حساسية أو تشبع تأثير يمكن أن تقلل من نطاق الكشف ، مما يؤدي إلى تشويه التكافؤ في تركيزات عالية من العينات .

2 - دقة نظام التحكم في درجة الحرارة

- درجة حرارة نظام رد الفعل : تقلب درجة حرارة الثقافة ( على سبيل المثال ± 1 ℃ ) يمكن أن تغير بشكل كبير من معدل الأيض البكتيري ، مما يؤدي إلى انحراف العلاقة بين الجرعة والاستجابة للجراثيم دائرة حجم وتركيز المضادات الحيوية . على سبيل المثال ، في 37 ± 0.5 ℃ القولونية ، الفرق في معدل النمو يمكن أن تصل إلى 15 ٪ ، والتي تؤثر بشكل مباشر على حساب التتر .

- التحكم في درجة الحرارة الداخلية للجهاز : الانحراف في درجة الحرارة من نظام التحكم في التدفق ( على سبيل المثال ، درجة الحرارة مربع العمود هبلك ) يمكن أن يؤدي إلى الانجراف الوقت الاحتفاظ ، مما يؤثر على تحديد منطقة الذروة من المضادات الحيوية من قبل اللوني .

3 - الهياكل الميكانيكية ونظم السوائل

- دقة الحقن : في الدقيقة ، microinjection ( على سبيل المثال ، 0.1-10 ميكرولتر ) من المضادات الحيوية المخفف يعتمد على دقة عالية مضخة تمعجية أو مضخة حقن . انسداد مضخة أو تذبذب سرعة التدفق يمكن أن يؤدي إلى جرعة التدرج خطأ ، مما يؤثر على مستوى منحنى خطي .

- خلط التوحيد : عندما تقاس turbidimetry ، كفاءة خلط تعليق البكتيرية والمضادات الحيوية في نظام رد الفعل يؤثر بشكل مباشر على التزامن من التعكر التغيير . تفاوت سرعة التحريك المغناطيسي أو عدم كفاية الوقت يمكن أن يؤدي إلى انخفاض pseudotaxis . . . . . . .

معايير التشغيل

1 . عينة تجهيز & تمييع

- الخطأ المضاعف المخفف : ينبغي تخفيف المعيار وعينة الاختبار بدقة المضاعف ( مثل التدرج المضاعف ) . انحراف المعايرة من ماصة ، pipette تقنية الفرق أو مصفوفة التدخل ( مثل ترسب البروتين ) يمكن أن يؤدي إلى تركيز التدرج التشويه .

- السيطرة على التجانس : عندما علقت عينة ( على سبيل المثال ، مسحوق حقن ) لا يهتز بما فيه الكفاية ، تفاوت توزيع حجم الجسيمات يمكن أن يؤدي إلى اختلاف تركيز المحلية ، مما يؤدي إلى زيادة معامل الاختلاف ( السيرة الذاتية ) من تكرار الاختبار .

2 - إعداد الكواشف المتوسطة

- نوعية وسائل الإعلام : يعتمد الأسلوب الميكروبيولوجي على الاتساق في تكوين وسائل الإعلام أجار مسطحة أو سائلة . قيمة الرقم الهيدروجيني الانحراف ( على سبيل المثال ، 7 ± 0.2 ) ، والتعقيم غير نظيفة أو إضافات ( على سبيل المثال ، الجلوكوز ، القوة الأيونية ) تقلب يمكن أن يغير من حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية .

- تركيز تعليق البكتيرية : يجب التحكم بدقة في قيمة التطوير التنظيمي من التلقيح السائل ( مثل 0.5 التعكر ماكسويل ) . عالية جدا أو منخفضة جدا من البكتيريا يمكن أن تتجاوز نطاق تثبيط خطي من المضادات الحيوية ، مما يؤدي إلى حافة غير واضحة أو غير فعالة .

3 . نافذة وقت التشغيل

- تأخر تأثير التلقيح : توقيت خلط المضادات الحيوية مع تعليق الميكروبية أمر بالغ الأهمية . فترة الحضانة طويلة جدا ( على سبيل المثال أكثر من 15 دقيقة ) قد يؤدي إلى تعطيل بعض المضادات الحيوية ( على سبيل المثال ، بيتا لاكتام التحلل ) ، مما أدى إلى انخفاض عيار .

- قراءة الوقت الاتساق : turbidimetric الأسلوب يتطلب قراءة قيمة التطوير التنظيمي في نقطة زمنية محددة ( على سبيل المثال ، 3-6 ساعات ) ، قبل الأوان أو في وقت متأخر جدا سوف تحيد عن الفاصل الزمني الخطي ، وإدخال نظام الخطأ .

ثالثاً - العوامل البيئية

1 . التحكم في درجة الحرارة والرطوبة

- درجة الحرارة المحيطة : تقلب درجة الحرارة في المختبر ( على سبيل المثال ، 25 ± 3 ℃ ) يمكن أن تؤثر على كفاءة التسخين و التوازن في نظام رد الفعل . على سبيل المثال ، عندما تكون درجة الحرارة في حاضنة الميكروبية انحرفت عن القيمة المحددة ± 1 ℃ ، قطرها من الجراثيم الدائرة قد تختلف من 5 ٪ إلى 10 ٪ .

- الرطوبة التدخل : بيئة عالية الرطوبة ( ره > 60 ٪ ) يمكن أن يؤدي إلى تشكيل الماء المكثف على سطح لوحة أجار ، تمييع تركيز المضادات الحيوية أو تعزيز انتشار الكائنات الحية الدقيقة ، مما يؤثر على وضوح دائرة الجراثيم .

2 - النظافة ومكافحة التلوث

- التلوث الميكروبيولوجي : إذا كان مكتب العمليات لا تطهيرها بواسطة الأشعة فوق البنفسجية ، أو إذا كان التلوث عبر عملية أخذ العينات ، أو إذا كان أي من الشوائب المتبقية في الثقافة المتوسطة ، فإنه سيتم عرض الخلفية فلورا و تتداخل مع تحديد الجراثيم الدائرة . على سبيل المثال ، عندما يكون معدل التلوث الجرثومي > 1 ٪ ، معدل الإيجابية الكاذبة يمكن أن ترتفع إلى 10 ٪ .

- تلوث الهباء الجوي : نشر الهباء الجوي ( على سبيل المثال ، دوامة التذبذب ) أثناء المعالجة يمكن أن تحمل البكتيريا إلى منطقة نظيفة ، وينبغي أن تستخدم مع تدفق الصفحي الغطاء ( ≥ الدرجة الثانية ) .

التداخل الكهرومغناطيسي والاهتزاز

- تداخل الإشارات : عندما يكون هناك مجال مغناطيسي قوي ( مثل الطرد المركزي ، ومحطة قاعدة للهاتف المحمول ) أو معدات عالية التردد ( مثل المايكرويف ) بالقرب من الصك ، قد يقترن الكشف عن إشارة الضوضاء ، مما يؤدي إلى الانجراف خط الأساس .

- الاهتزازات الميكانيكية : الاهتزازات في حاضنة أو شاكر الميكروبية يمكن أن تلحق الضرر التسطيح من سطح لوحة أجار ، مما يجعل دائرة الجراثيم البيضاوي بدلا من التعميم ، مما يؤثر على دقة قياس القطر .

خصائص العينة

1 - نوع وتركيز المضادات الحيوية

- استقرار المجموعة النشطة : β - لاكتام المضادات الحيوية يمكن أن تتحلل بسهولة تحت ظروف حامضية ، إذا كانت العينة المعالجة غير لائق ( مثل درجة الحموضة أقل من 4 ) ، قد تفقد أكثر من 30 ٪ من عيار .

- ملاءمة التدرج التركيزي : يجب أن يغطي المنحنى القياسي نطاق تركيز العينة المراد قياسها . التجاوز ( مثل ضعف الحد الأقصى الخطي ) يمكن أن يؤدي إلى ربط تأثير الجرعة منحنى الاستجابة ، نقلل من قوة عالية التركيز عينة .

مصفوفة تأثير التدخل

- تأثير السواغات : يمكن أن تمتز الحشوات في أقراص أو كبسولات ( مثل اللاكتوز أو المغنيسيوم الإستارات ) بالمضادات الحيوية أو تغيير درجة الحموضة في الحل ، ويجب إزالتها بواسطة الطرد المركزي أو الترشيح .

- تدخل المواد الذاتية : البروتينات والسكريات في مصل الدم أو خليط الأنسجة قد تكون جنبا إلى جنب مع المضادات الحيوية ، والحد من تركيز الدواء مجانا ، تحتاج إلى تنقية من خلال غسيل الكلى أو الصلبة مرحلة الاستخراج .

اختيار والتحقق من المنهجية

1 - تحديد مدى ملاءمة المنهجية

- القيود المفروضة على النهج الميكروبيولوجي : تتطلب المعالجة السريعة للمضادات الحيوية غير المستقرة حراريا ( مثل السيفالوسبورين ) ، واختيار السلالات ( مثل العصوية الرقيقة ضد المكورات العنقودية الذهبية ) يؤثر تأثيرا مباشرا على الحساسية .

- التحدي الكروماتوغرافي : هبلك أو م ع يجب أن تتطابق مع العمود الكروماتوغرافي المناسب ( على سبيل المثال ، C18 عكس العمود ) للكشف عن ( على سبيل المثال ، الأشعة فوق البنفسجية أو الطيف الكتلي ) التي قد تتداخل مع الوقت الاحتفاظ التدخل قمم في المصفوفة المعقدة .

2 - المعايير والمقاييس

- إشارة التتبع : معيار يجب أن تكون معتمدة من قبل جامعة جنوب المحيط الهادئ / EP / CHP ، فرق القوة بين دفعات أقل من 3 ٪ . تاريخ انتهاء الصلاحية أو سوء التخزين ( على سبيل المثال ، وتجميد المنتجات المجففة مرارا وتكرارا ذوبان الجليد ) يمكن أن يؤدي إلى عدم معايرة القيمة .

- تصميم التجارب الموازية : ينبغي أن تتضمن كل دفعة عينات عالية ومتوسطة ومنخفضة التركيز لمراقبة الجودة لرصد الدقة ( RSD < 5 في المائة ) والانتعاش ( 95 ٪ - 105 في المائة ) .