التلقائي أداة قياس المجال للجراثيم هو أداة هامة لتقييم حساسية الميكروبات في مجالات علم الأحياء الدقيقة ، الصيدلة ، الكشف عن الأغذية ، وما إلى ذلك وظيفتها الأساسية هي دقة قياس القطر أو المنطقة من خلال تحليل الصور التكنولوجيا . ومع ذلك ، فإن دقة قياس النتائج تتأثر بعوامل كثيرة ، بما في ذلك معالجة العينات ، وأداة الأداء ، والظروف البيئية ، ومعايير التشغيل ، وتحليل البيانات ، وهلم جرا .

عينة من العوامل ذات الصلة

1 - إعداد وسائل الإعلام ونوعيتها

- تكوين ودرجة الحموضة : الصيغة المتوسطة ودرجة الحموضة تؤثر بشكل مباشر على معدل نمو الميكروبات وانتشار الميكروبات . على سبيل المثال ، الرقم الهيدروجيني الانحراف عن النطاق الأمثل يمكن أن تمنع البكتيريا من التمثيل الغذائي ، مما يؤدي إلى طمس حافة الجراثيم الدائرة .

- سمك والتجانس : صب وسائل الإعلام غير موحدة ( مثل سمك الفرق > 0.5mm ) يمكن أن يؤدي إلى تفاوت معدل انتشار المخدرات ، وتشكيل دائرة غير دائرية من الجراثيم .

- حالة التجمد : قد يسبب عدم التجمد الكامل لوسائل الإعلام غرق ورقة أو خلل في انتشار المخدرات .

2 . تركيز ونشاط البكتيريا تعليق

- التحكم في التركيز : تركيز البكتيريا تعليق يجب أن تستوفي المعايير ( مثل 0.5 ماكسويل التعكر ) ، تركيز عال جدا ( > 10 ⁸ كفو / مل ) يمكن أن يؤدي إلى الحد من أو حتى اختفاء الجراثيم الدائرة ، منخفضة جدا ( < 10 ⁶ كفو / مل ) قد تظهر في النمو ، من الصعب تحديد الحافة .

- نقاء وحيوية البكتيريا : تلوث البكتيريا أو الشيخوخة من البكتيريا ( على سبيل المثال ، الكثير من مرور مرات ) يمكن أن يغير من حساسية العقاقير ، مما يؤدي إلى انحراف النتائج .

3 - توحيد أقراص حساسة للأدوية

- محتوى الدواء و التوحيد : انحراف أكثر من 10 ٪ من محتوى الدواء في قرص يمكن أن تؤثر بشكل كبير على حجم دائرة الجراثيم ، على سبيل المثال ، إذا كان محتوى أمبيسلين قرص غير كافية ، قد يؤدي إلى نتائج كاذبة مقاومة المخدرات .

- ظروف التخزين : يجب الحفاظ على قطعة من الورق في مأمن من الضوء والرطوبة ( مثل التخزين البارد في 4 درجة مئوية ) ، ويمكن أن يؤدي التعرض للرطوبة أو انتهاء صلاحيتها ( عادة لمدة 6 أشهر ) إلى إبطال مفعول الدواء أو إلى تفاوت انتشاره .

- وضع التكنولوجيا : ورقة ليست على اتصال وثيق مع وسائل الإعلام ( على سبيل المثال ، يميل أكثر من 15 درجة ) أو منعت من قبل فقاعات الهواء ، يمكن أن تعوق انتشار المخدرات ، وتشكيل " المذنب " الجراثيم الدائرة .

عامل أداء الجهاز

1 . دقة النظام البصري

- القرار والوضوح : عدم كفاية بكسل الكاميرا ( على سبيل المثال أقل من 5 ملايين ) أو تفاوت مصدر الضوء ( على سبيل المثال ، الفرق في سطوع الصمام الدائري > 10 ٪ ) يمكن أن يؤدي إلى خطأ في تحديد حافة دائرة الجراثيم ، وخاصة شبه شفافة أو دائرة الجراثيم الصغيرة ( قطرها أقل من 5 مم ) .

- المحاذاة والتركيز : يمكن للمعايرة غير المنتظمة ( على سبيل المثال مرة واحدة في الشهر ) أو إزاحة التركيز ( على سبيل المثال ، طمس التصوير ) أن تؤدي إلى أخطاء في قياس قطرها > 0.5 مم ، مما يؤثر على معايير تحديد CLSI ( على سبيل المثال ، والحساسية ، والوسطاء ، وتصنيف المقاومة ) .

2 . موثوقية البرمجيات الخوارزمية

- القدرة على الكشف عن الحافة : عتبة التقليدية تجزئة خوارزمية غير النظامية الجراثيم دائرة ( مثل مشرشف مثل سن المنشار أو القطع الناقص ) دقة تحديد الهوية منخفضة ، في حين أن عمق التعلم الخوارزمية ( مثل u-net نموذج ) يمكن أن تزيد من معدل الاعتراف الصرفية المعقدة إلى أكثر من 95 ٪ .

- تركيب خطأ : نموذج رياضي ( على سبيل المثال ، طريقة المربعات الصغرى ) يمكن أن تنتج تركيب الانحراف بسبب عدم كفاية نقاط البيانات ( على سبيل المثال ، تردد أخذ العينات أقل من 100 نقطة / حلقة ) عند تركيب البرمجيات دائرة .

3 . الاستقرار الميكانيكية

- التسطيح من الجدول الناقل : وضع الميل > 2 درجة في طبق بتري يمكن أن يؤدي إلى تشويه الصورة التي تحتاج إلى تصحيح تلقائيا مع أجهزة الاستشعار الأفقي .

- اضطرابات الاهتزازات : يمكن أن تؤدي الاهتزازات في بيئة المختبر ( مثل تشغيل أجهزة الطرد المركزي ) إلى اهتزاز في الصورة ، مما يتطلب استخدام منصة إلكترونية لمنع الاهتزازات أو تثبيت منصة لامتصاص الصدمات .

العوامل البيئية

1 . درجة الحرارة والرطوبة وتدفق الهواء

- درجة حرارة الثقافة : كل زيادة في درجة حرارة 35 ± 2 درجة مئوية عن مستوى درجة الحرارة ، معدل الأيض البكتيرية بنسبة 10 ٪ ، والتي يمكن أن تؤدي إلى توسيع أو تقليص دائرة الجراثيم .

- تأثير الرطوبة : الرطوبة العالية ( > 70 ٪ ) من البيئة يمكن أن يؤدي بسهولة إلى نزح المياه من وسائل الإعلام أو امتصاص الرطوبة من ورقة ، وتغيير حركية الافراج عن المخدرات .

- اضطراب تدفق الهواء : معقم سرعة الرياح > 0.2m / s قد ضربة ورقة أو تأخذ جزيئات الدواء بعيدا ، يجب أن تعمل في خزائن السلامة البيولوجية .

الإضاءة و التداخل الكهرومغناطيسي

- استقرار مصدر الضوء : اضمحلال عمر مصباح هالوجين ( مثل استخدام > 1000 ساعة ) يمكن أن يؤدي إلى انخفاض السطوع ، مما يؤثر على النقيض من التصوير .

- التداخل الكهرومغناطيسي : يمكن أن تتداخل المعدات القريبة ( مثل أجهزة الطرد المركزي وأفران الميكروويف ) مع دوائر جمع الصور التي تحتاج إلى درع أرضي .

معايير التشغيل

1 . عينة تحميل الاتساق

- توزيع الأوراق : يجب أن تكون المباعدة بين الأوراق أكثر من 25 مم ، وذلك لتجنب التداخل بين دوائر الجراثيم مما يؤدي إلى الارتباك في القياس .

- الثقافة الوقت : وقت القراءة في وقت مبكر جدا ( على سبيل المثال 6 ساعات ) قد لا تشكل دائرة الجراثيم مستقرة ، في وقت متأخر جدا ( على سبيل المثال 24 ساعة ) قد يؤدي إلى الإفراط في نمو بعض السلالات لتغطية الحواف .

2 . إعداد المعلمة العقلانية

- عتبة التكيف : عتبة الرمادي يجب تعديلها بشكل حيوي وفقا ضجيج الخلفية ، عتبة ثابتة قد يؤدي إلى سوء التقدير من خلفية عالية متوسطة مثل الجراثيم الدائرة .

- طريقة القياس : وضع حساسية عالية ينبغي أن تستخدم ضد الميكروبات الصغيرة ( على سبيل المثال ، فان كونيا الكشف ) ، في حين أن أكبر منطقة ( أكثر من 30 ملم ) يجب أن تمنع حافة البتر .

3 - التكرار والخطأ البشري

- اختلاف القياسات المتعددة : ينبغي أن تكون الفروق في القياسات بزاوية مختلفة داخل ± 0.2mm لنفس العينة ، ويجب أن يكون متوسط القيمة في طبق بتري بالتناوب على الأقل أربع مرات .

- خبرة المشغل : يمكن للمبتدئ أن يساء تقدير حافة الدائرة المضادة للبكتيريا ( على سبيل المثال عن طريق إدراج مستعمرة ساتلية ) التي تحتاج إلى الجمع بين الاستعراض الآلي واليدوي .

معالجة البيانات وتحليلها

1 - القيود المفروضة على البرمجيات الخوارزميات

- معالجة القيم الشاذة : البرمجيات قد خطأ فقاعة أو النجاسة في دائرة الجراثيم ، تحتاج إلى تعيين منطقة عتبة الترشيح ( على سبيل المثال < 1 ملم ² القضاء ) .

- وحدة التوحيد : يجب معايرة أخطاء التحويل للوحدات من أجهزة مختلفة ( مثل نسبة الملليمتر إلى بكسل ) لتجنب عدم قابلية البيانات عبر المختبرات للمقارنة .

2 - الذاتية في تفسير النتائج

- تحديد القيم الحرجة : CLSI المعايير ( على سبيل المثال ، أوكساسيلين الجراثيم دائرة أكثر من 20 ملم حساسة ) يجب أن تكون جنبا إلى جنب مع خصائص البكتيريا ، والبرمجيات التفسير التلقائي قد تجاهل آليات نادرة مقاومة المخدرات ( على سبيل المثال ، هذه الجرثومة يجب أن تكون جنبا إلى جنب مع cefoxitin الاختبار ) .

3 - تسجيل البيانات والتتبع

- أرشفة الصور الأصلية : يجب حفظ الصور عالية الدقة ( مثل المشاجرة ) للاستعراض ، والاعتماد فقط على السجلات الرقمية قد تفقد التفاصيل الرئيسية .

- مراقبة الجودة عينة القياسية : التحقق من دقة الجهاز مع معيار دائرة الجراثيم قالب ( على سبيل المثال ، قطرها 10mm ± 0.1mm ) بانتظام ، الانحراف أكثر من 1 ٪ يحتاج إلى إعادة معايرة .