كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء للكشف عن مضان ( FLD ) هو نوع من حساسية عالية ، عالية الانتقائية للكشف عن مناسبة لإنتاج مضان من المركبات أو المواد التي ينبعث منها ضوء بعد derivatization . . . . . . . الميزة الأساسية هي أن حساسية يمكن أن تصل إلى عدة مرات من الأشعة فوق البنفسجية للكشف عن قدرة تفتخر قوية .
آلية عمل كاشف مضان على أساس ظاهرة الذرات ، الخطوات الأساسية هي كما يلي :
مصدر الضوء ( عادة زينون مصباح ، مصباح الزئبق أو ليزر ديود ) تنبعث منها ضوء الإثارة مع طول موجة معينة ، و الإثارة شعاع ضوء مع طول موجة واحدة يتم فرزهم من خلال أحادي اللون ( مقضب أو فلتر ) و التركيز على تدفق السائل من العمود الكروماتوجرافى ( الكشف عن الخلية ) . عندما يتم امتصاص الطاقة الضوئية متحمس ، جزيء يمكن الانتقال من أرض الدولة ( دولة مستقرة ) إلى دولة متحمس ( عالية الطاقة ) .
مضان الانبعاثات في دولة متحمس من عدم الاستقرار الجزيئي ، في وقت قصير جدا ( 10 ⁸ ～ 10 ⁻ ⁻ ثانية ) من خلال عدم انتقال إشعاعي من فقدان جزء من الطاقة ، والعودة إلى الولايات متحمس * انخفاض مستوى الاهتزاز ، ثم من خلال الانتقال الإشعاعي من الفوتونات المنبعثة ، العودة إلى أرض الدولة ، هذه العملية تنتج ضوء الفلورسنت . الطول الموجي مضان هو دائما أكبر من الطول الموجي الإثارة ( ستوكس التحول ) ، الذي هو سمة أساسية من مضان الكشف .
من أجل تجنب التدخل من الإثارة الخفيفة ، نظام استقبال مضان كاشف ( PMT أو الثنائي الضوئي ) عادة ما يقع في زاوية 90 درجة مع الإثارة البصرية المسار . انبعاث مضان هو فحص من قبل أحادي اللون ، ثم يتم تحويلها إلى إشارة كهربائية من قبل photodetector . . . . . . . العلاقة بين كثافة إشارة كهربائية وتركيز المكونات تحت الاختبار هو خطي في نطاق معين .
عملية الاختبار :
الإثارة مصدر الضوء ( على سبيل المثال ، مصباح زينون أو ليزر ) تنبعث من الطيف المستمر ، بعد أن تم تقسيمها من قبل أحادي اللون ، الطول الموجي المحدد هو اختيار الإثارة الخفيفة .
ضوء الإثارة تشع المواد الفلورية في عينة الخلية لإنتاج مضان .
إشارات الفلورسنت يتم الكشف عنها من قبل عناصر حساسة للضوء ( على سبيل المثال ، مضخم أنبوب ) من خلال مسار الضوء في زاوية الحق ( تجنب إثارة تدخل الضوء ) وتحويلها إلى إشارات كهربائية .
إشارة كهربائية يتم تضخيمها ونقلها إلى نظام معالجة البيانات لتوليد الكروماتوغرافي .
كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء للكشف عن مضان هو أداة هامة في تتبع التحليل بسبب حساسية عالية وعالية الانتقائية . ومع ذلك ، فإن عدم التعميم والحساسية التدخل يحد من نطاق التطبيق . من خلال الجمع بين مصدر ضوء الليزر ، جنبا إلى جنب مع تقنية أو derivatization الأسلوب ، والقدرة التحليلية يمكن أن تكون موسعة لتلبية متطلبات الكشف عن عينات معقدة . . .