الاستخدام السليم وصيانة العمود الكروماتوجرافى مهم جدا ، قليلا من الإهمال سوف تقلل من كفاءة العمود ، وتقصير مدة الخدمة ، وحتى الضرر . أثناء عملية الكروماتوغرافي ، ينبغي إيلاء الاهتمام إلى المسائل التالية من أجل الحفاظ على العمود الكروماتوغرافي .
تجنب التغيرات السريعة في الضغط ودرجة الحرارة أي اهتزاز ميكانيكي . تغيير مفاجئ في درجة الحرارة أو السقوط من ارتفاع العمود الكروماتوجرافى سوف تؤثر على حالة التعبئة ؛ زيادة مفاجئة أو نقصان في ضغط العمود يمكن أن تدفع أيضا التعبئة والتغليف في العمود ، لذلك ينبغي أن يكون بطيئا في تنظيم سرعة التدفق ، صمام في أخذ العينات لا يمكن أن يكون بطيئا جدا ( كما ذكر سابقا ) .
تكوين المذيبات يجب أن تتغير تدريجيا ، ولا سيما في عكس المرحلة اللوني ، لا ينبغي أن تتغير مباشرة من المذيبات العضوية إلى الماء ، والعكس بالعكس .
عموما العمود الكروماتوجرافى لا يمكن ارتداد ، إلا إذا كان المنتج يشير إلى أن العمود يمكن ارتداد ، يمكن ارتداد إلى إزالة الشوائب المتبقية في وصمة العار . وإلا فإن الارتداد سوف يقلل من كفاءة العمود بسرعة .
اختيار مناسبة المرحلة النشطة ( وخاصة درجة الحموضة ) لتجنب تدمير المرحلة الثابتة . في بعض الأحيان ، قبل العمود يمكن أن تكون مرتبطة مع الجزء الأمامي من العينات ، عندما يكون العمود التحليلي هو المستعبدين هلام السيليكا ، قبل العمود هو هلام السيليكا ، والتي يمكن أن تجعل المرحلة النشطة قبل المشبعة من هلام السيليكا قبل دخول العمود التحليلي ، وبالتالي تجنب حل هلام السيليكا مصفوفة في تحليل العمود .
تجنب حقن عينة معقدة من المصفوفة ، ولا سيما عينة بيولوجية ، مباشرة في العمود ، تحتاج إلى المعالجة أو ربط العمود الواقية بين العينات و العمود الكروماتوجرافى . حماية العمود هو عمود قصير مع مماثلة ثابتة المرحلة . حماية العمود يمكن وينبغي استبدالها في كثير من الأحيان .
في كثير من الأحيان استخدام المذيبات القوية شطف العمود الكروماتوجرافى ، وإزالة الشوائب المخزنة في العمود . أثناء التنظيف ، واستبدال المرحلة النشطة في الحمل الحراري نظام الطريق ينبغي أن يكون تدريجيا مع المذيبات غير قابلة للامتزاج ، وحجم كل مرحلة نشطة ينبغي أن يكون حوالي 20 مرة من حجم العمود ، وهذا هو ، التحليل الروتيني يتطلب 50 ~ 75 مل .
وفيما يلي قائمة من تنظيف المذيبات تسلسل العمود كمرجع : هلام السيليكا العمود شطف مع الهكسين ( أو هيبتان ) ، ثنائي كلورو ميثان والميثانول ، ثم شطف في تسلسل عكسي ، جميع المذيبات يجب أن يكون بدقة المجففة . الميثانول يمكن أن يغسل بقايا الشوائب القطبية القوية ، الهكسين يمكن تنشيط سطح هلام السيليكا . عكس المرحلة العمود هو غسلها مع الماء ، والميثانول ، الأسيتونيتريل ، كلورو ميثان ( أو الكلوروفورم ) في تسلسل ، ثم شطف في تسلسل عكسي . إذا كانت المرحلة النشطة المستخدمة في التحليل التالي لا تحتوي على عازلة ، شطف مع الماء بعد زوي يمكن حذفها . monochloromethane يمكن أن يغسل بقايا الشوائب غير القطبية ، وتكرار حقن 100 ~ 200 μ ل رباعي هيدرو الفوران عدة مرات أثناء غسل الميثانول ( الأسيتونيتريل ) يساعد على إزالة الشوائب مسعور بقوة . . . الحل المختلط من رباعي هيدرو الفوران مع الأسيتونيتريل أو الميثانول يمكن إزالتها من الدهون . في بعض الأحيان dimethylsulfoxide أيضا حقن عدة مرات . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن عملية الاستخراج الانحدار مع الأسيتونيتريل ، والأسيتون ، trifluoroacetic حامض ( 0.1 في المائة ) يمكن إزالة التلوث من البروتين .
تبادل الأيونات الموجبة العمود يمكن غسلها مع حمض مخفف العازلة ، أنيون تبادل العمود يمكن غسلها مع محلول قلوي مخفف لإزالة الملح مع تبادل قوية الأداء ، ثم الماء ، والميثانول ، ثنائي كلورو ميثان ( باستثناء المواد العضوية كثف على سطح المرحلة الثابتة ) ، والميثانول والماء شطف بدوره .
الحفاظ على العمود الكروماتوجرافى يجب أن تكون مليئة الأسيتونيتريل أو الميثانول ، العمود المشترك يجب تشديد لمنع تبخر المذيبات الجافة . لا تترك عازلة في العمود بين عشية وضحاها أو لفترة أطول .
في عملية استخدام العمود الكروماتوجرافى ، إذا كان الضغط يرتفع ، نوع واحد هو ممكن يضغط مرشح قطعة مسدودة ، ينبغي استبدال فلتر قطعة أو تأخذ بها في هذا الوقت يحمل على التنظيف . احتمال آخر هو أن الجزيئات الكبيرة في العمود بحيث وصمة عار ملوثة . إذا كان العمود هو انخفاض الكفاءة أو الكروماتوغرافي ذروة التشويه ، ثم قد يكون هناك انهيار في العمود ، وزيادة حجم الميت .
في الحالتين الأخيرتين ، بعناية فك العمود المشترك ، مع تنظيف الصلب الصغيرة سوف تأخذ من 1 إلى 2 ملم ارتفاع التعبئة ( الانتباه إلى إزالة التلوث التعبئة ) ثم العمود التعبئة التسوية . ثم ملء العمود الكروماتوجرافى مع مرحلة ثابتة ( نفس في العمود ) الرطب مع المذيبات المناسبة ، تسطيح ، وتشديد العمود المشترك . بعد هذا العلاج ، وتحسين كفاءة العمود ، ولكن من الصعب العودة إلى مستوى العمود الجديد .