العمود الكروماتوجرافى هو عنصر أساسي من عناصر نظام التحليل الكروماتوجرافى ، طريقة التعبئة والتغليف لديها تأثير مباشر على كفاءة الفصل ، ذروة التماثل و العمود الحياة . معقولة عملية التعبئة والتغليف يجب أن تأخذ في الاعتبار خصائص التعبئة والتغليف ، والتعبئة التوحيد ، عمود السرير والاستقرار بعد الطلب . عملية التعبئة و النقاط الرئيسية في العمود الكروماتوجرافى وصفها بالتفصيل من ثلاثة جوانب : التعبئة والتغليف المعالجة ، طريقة التعبئة والتغليف ، والتعبئة بعد العلاج .

التعبئة المعالجة

1 . التعبئة والتغليف واختيار العلاج

- حجم الجسيمات والتوزيع : التعبئة والتغليف مع حجم الجسيمات المناسبة ( عادة 3-50 μ م ) يتم اختيارها وفقا لنموذج الكروماتوغرافي ( على سبيل المثال ، هبلك ، GC ) ضيق توزيع حجم الجسيمات ( على سبيل المثال ، الحزب الديمقراطي المسيحي < 1-2 ) يمكن أن تزيد من تجانس التعبئة والتغليف .

- المعالجة السطحية : السليكا هلام حشو مصفوفة يجب ضبط درجة الحموضة لتجنب الامتزاز الكهربائي ؛ مسعور C18 حشو يجب أن تكون سابقة التجهيز مع الميثانول أو الأسيتونيتريل للحد من التكتل .

- إزالة الرغوة والتشتت : يتطلب تعليق التعبئة إزالة الرغوة بالموجات فوق الصوتية لتفادي حدوث تجاويف أثناء عملية التعبئة؛ بعض السطحي ( مثل كحولالأيسوبروبيل ) يمكن أن تضاف إلى اللزوجة العالية زي الطين لتحسين تشتت .

العمود اللوني المعالجة

- التنظيف والتجفيف : يجب تنظيف أنابيب العمود بمذيبات مثل الميثانول والتولوين لإزالة الحطام المعدني أو الشحوم ، تليها ضربة النيتروجين أو فراغ التجفيف .

- المعالجة السطحية : يجب أن تكون خشونة مدخل ومخرج الأنبوب أقل من 0.1 ميكرومتر لمنع تسرب الحشوات؛ طلاء خامل مثل بوليميد يمكن تطبيقها على تعزيز الختم .

طريقة التحميل

1 . التعبئة والتغليف الرطب

- إعداد خليط : خلط حشو مع المذيبات ( مثل الميثانول / الماء ، الأسيتونيتريل / الماء ) على شكل تعليق مع محتوى الصلبة من 5 ٪ - 30 ٪ .

- ملء مضخة تدفق مستمر : حقن الخليط في أنبوب من خلال ارتفاع ضغط مضخة تدفق مستمر ، مع معدل التدفق عادة 5-20 مل / دقيقة و الضغط في 60-120 بار . خلال عملية التعبئة ، العمود الجدار يجب أن يكون باستمرار طرقت ، فقاعات الهواء الافراج عن التعبئة والتغليف يمكن أن تكون معبأة بإحكام .

- التدرج في تخفيف الضغط : سرعة التدفق إلى 0.1 مل / دقيقة بعد الانتهاء من التحميل ، والحفاظ على 10-15 دقيقة لتحقيق الاستقرار في العمود هيكل السرير .

2 . خليط التعبئة

- التعبئة المتوازنة الديناميكية : يتم ضخ تعليق التعبئة في وقت واحد مع استبدال السائل ( مثل المذيبات النقية ) في أنبوب العمود ، وذلك باستخدام فرق الكثافة لتحقيق تسوية طبقية . على سبيل المثال ، C18 حشو يمكن استخدام الميثانول كبديل ، السليكا هلام حشو يجب أن تتطابق مع المذيبات القطبية .

- التحكم في درجة الحرارة : ارتفاع درجة الحرارة إلى 40-60 ℃ يمكن أن تقلل من لزوجة المذيبات ، وتسريع تسوية التعبئة ؛ بعد التبريد إلى درجة حرارة الغرفة ، وطدت العمود السرير لتجنب تكسير بسبب التمدد الحراري .

3 - التعبئة الجافة

- مناسبة لأنّ مشاهد : في الدّرجة الأولى يستعمل لأنّ حشوة مع حجم كبيرة ( مثل 50-200 [ مو م ] ) أو خاصّة شكل حشوة ( مثل هذا بما أنّ عمود متآلف ) .

- تسوية الجاذبية : صب حشو ببطء في أنبوب العمود ، اضغط على جدار العمود برفق ، مع مساعدة من الجدول الهز ، وجعل التعبئة الطبيعية الكثيفة تتراكم . بعد وضع لوحة غربال مثقب في الأعلى ، يتم الضغط على 5-10 بار علاج .

بعد العلاج

اختبار وتصحيح العمود

- الفحص البصري : ملاحظة ما إذا كان السرير هو عمود متجانس من خلال طريقة انتقال الضوء أو SEM ، وإذا كان هناك صدع أو قناة ، يجب إعادة صياغة وإعادة تجميعها .

- اختبار سرعة التدفق : غسل الأعمدة بالمذيبات النقية وتسجيل الضغط الخلفي؛ العمود المثالي الضغط ينبغي أن تكون قريبة من القيمة النظرية ( على سبيل المثال ، انخفاض الضغط من هبلك العمود أقل من أو يساوي 10 في المائة ) .

2 - تقييم فعالية العمود

- التحقق من المعايير : حقن النفثالين والبنزين وغيرها من المواد الجزيئية الصغيرة ، وحساب عدد الصواني ( ن > 10 , 000 / م ) و عامل غير المتماثلة ( كما < 1.5 ) ، لضمان عدم وجود خندق أو منطقة ميتة .

- اختبار الاستقرار على المدى الطويل : أخذ العينات باستمرار 100-200 مرة ، ورصد التغيرات في الوقت الاحتفاظ ومنطقة الذروة ، وتقييم درجة التعبئة والتغليف قفل ومكافحة التلوث القدرة .

3 - التخزين والحفظ

- الإغلاق في كلا طرفي الأنبوب : إغلاق الأنبوب باستخدام سدادة خاصة لمنع دخول الملوثات؛ التخزين على المدى الطويل يتطلب الحفاظ على المذيبات التي تحتوي على المواد الحافظة ( مثل 0.05 ٪ أزيد الصوديوم ) .

- مراقبة البيئة : تجنب الضوء والحفاظ على درجة حرارة ثابتة ( 15-25 درجة مئوية ) البيئة ، هلام السيليكا العمود يجب أن تكون صارمة moistureproof ، عكس العمود لتجنب تجميد يؤدي إلى تلف هيكل التعبئة والتغليف .

النقاط الرئيسية في التعبئة الخاصة

1 . مراوان العمود الكروماتوجرافى : المغلفة مراوان الحشو يجب أن تكون معبأة في جو خامل لتجنب الأكسدة التعطيل . المستعبدين حشو يجب التحكم في درجة الحموضة لمنع اللجين من السقوط .

2 . electrochromatography الشعرية العمود : يستخدم في الموقع أو البلمرة الكهربي محرك التعبئة ، تحتاج إلى مراقبة دقيقة من شدة المجال الكهربائي ( على سبيل المثال 50-200 الخامس / سم ) و تكوين العازلة .

3 . UHPLC العمود : عندما sub-2 ميكرون التعبئة والتغليف المستخدمة ، يجب أن تكون مجهزة أنبوب العمود مع الضغط أكثر من 1200 بار .