اختيار ايس العمود الكروماتوجرافى يجب أن تكون موجهة نحو فصل الهدف ، مرحلة ثابتة مميزة ، المعلمة المادية ونظام القيد صناعيا وزنها . ويقترح أن خصائص العينة وفصل الأهداف ينبغي تقييمها أولا ، ثم المقابلة مرحلة ثابتة ينبغي أن تكون مطابقة .
وفيما يلي وصف لشروط اختيار ايس العمود :
تحديد أهداف التطبيق و خصائص العينة
خصائص أكثر
قطبية و الذوبان : إذا كنت بحاجة إلى الحفاظ على مركبات قطبية قوية ( على سبيل المثال ، الببتيدات ، والسكريات ، يفضل اختيار ماء كتلة ثابتة ؛ مسعور عينات ( مثل الفيتامينات الذائبة للدهون ) تنطبق على c18-hl العمود مع ارتفاع محتوى الكربون .
الحموضة والاستقرار : مركبات قلوية من السهل أن تتفاعل مع مجموعات الهيدروكسيل السيليكون الثانوية ، مما يؤدي إلى الذروة الذيل . سوبر خامل المرحلة الثابتة ( على سبيل المثال ، سلسلة C18 ) ينبغي أن تستخدم للحد من بقايا هيدروكسيل السيليكون من خلال تعطيل القلوي ، وتحسين كفاءة الفصل . . . . . . .
وضع شرط الانفصال
reversed-phase اللوني : C18 أو C8 العمود تم اختيارها بشكل روتيني . فينيل العمود يمكن استخدامها لتعزيز الانتقائية في المركبات العطرية .
طرق تطوير المرونة : توفير الانتقائية التفاضلية على مزيج معقد ( مثل الايزومرات ) ، c18-ar أو c18-pfp العمود الانصهار مزايا اثنين من السندات المرحلة .
اختيار البارامترات الفيزيائية الأساسية
حجم الجسيمات و كفاءة العمود
م : مناسبة لأنّ uhplc مع أعلى كفاءة العمود ، ولكن زيادة كبيرة في الضغط مرة أخرى .
م حجم الجسيمات : هو خيار شائع من هبلك مع مراعاة كفاءة العمود ونظام التوافق .
م حجم الجسيمات : تستخدم لفحص سريع أو إعداد فصل المرحلة .
بعد تصميم العمود
الطول : 150mm هو اختيار التوازن التقليدية ، 250mm هو مناسبة لأنّ عينات معقدة ، قصيرة العمود يستخدم عالية السرعة الانفصال .
القطر الداخلي : 4.6mm القياسية ، 2.1mm microanalysis ، أكثر من 10 ملم في إعداد الصف .
الفتحة مطابقة
100 Å : مناسبة للجزيئات الصغيرة ( الوزن الجزيئي < 1000 دا ) .
300 Å : المسام الكبيرة تدعم عزل الجزيئات الحيوية مثل البروتينات والببتيدات .
التوافق و الاعتبارات التشغيلية
معدات اللياقة البدنية
uhplc النظام : sub-2 ميكرون معبأة العمود يجب أن تستخدم لتحمل الضغط العالي .
إعدادي هبلك : اختيار كبيرة قطرها الداخلي العمود للحد من خطر انسداد .
المرحلة المحمول الحد
ارتفاع المياه المرحلة شرط : c18-aq العمود تعتمد تقنية تضمين القطبية ، وتمنع ماء والحفاظ على الاستقرار .
قيمة الرقم الهيدروجيني : تجنب استخدام هلام السيليكا التقليدية مصفوفة العمود ، يمكنك اختيار الجزيئات المختلطة أو البوليمر العمود .