مستعمرة العد اختبار قطعة ( أو البكتيرية ورقة ) هو نوع من أداة الكشف عن الكائنات الحية الدقيقة المستخدمة في الكشف عن كمية من البكتيريا في عينات من المياه ، والغذاء ، والأدوية ، والهواء ، الخ . هذه الطريقة غالبا ما تستخدم للحكم على التلوث الجرثومي في العينات بسرعة وسهولة . من خلال مراقبة نمو مستعمرة على قطعة من الورق ، محتوى الكائنات الحية الدقيقة في العينة يمكن تقييمها . وفيما يلي خطوات المراقبة لنتائج الاختبار الميكروبيولوجي لمجموع عدد المستعمرات في أقراص الاختبار :
1 - الأعمال التحضيرية
إعداد العينة : إعداد عينة اختبار وفقا لنوع العينة ( مثل الماء ، الهواء ، والغذاء ، الخ . )
عملية العقيم : التأكد من أن جميع الأدوات والحاويات والبيئة معقمة أثناء العملية ، وتجنب تأثير التلوث الخارجي على نتائج الاختبار .
إعداد اختبار قطعة : تأكد من أن مجموع عدد المستعمرات اختبار قطعة صالحة وتخزينها وفقا للتعليمات . التحقق من أن اختبار قطعة جافة وخالية من الضرر .
2 - الخطوات العملية
عينة التطعيم : التطعيم عينة على اختبار قطعة وفقا لمتطلبات الاختبار ( مثل تخفيف حجم العينة ، الخ . ) عند التلقيح ، تأكد من أن المشغل اليد أو غيرها من الأدوات خالية من التلوث ، وتجنب التلوث الصليب .
الثقافة : وضع اختبار قطعة في الثقافة المناسبة ( عادة في درجة حرارة ثابتة حاضنة 37 درجة مئوية ) . اعتمادا على نوع العينة و معدل نمو البكتيريا ، وعادة ما يستغرق 24-48 ساعة .
ملاحظة : بعد الثقافة ، ومراقبة ما إذا كان هناك نمو مستعمرة على ورقة . المستعمرات عادة ما تكون بيضاء أو صغيرة مستديرة اللون ، وحجم وشكل ولون تختلف اعتمادا على نوع من البكتيريا .
3 - مراقبة أنواع وكميات من المستعمرات
عدد المستعمرات
عد المستعمرات : كل مستعمرة مرئية تمثل البكتيريا . عدد البكتيريا في كل وحدة من العينات ( عادة ما تكون مستعمرة لكل ملليلتر أو غرام من العينات ) حسبت على أساس الثقافة النتائج .
القيمة القياسية الحكم : الحكم على ما إذا كانت عينات الاختبار تلبية متطلبات الصحة والسلامة أو الجودة وفقا للمعايير الوطنية أو المعايير الصناعية . في العام ، القيم القياسية من مجموع عدد المستعمرات تختلف حسب نوع العينة .
شكل مستعمرة
أشكال مختلفة من المستعمرات : المستعمرات على اختبار قطعة قد تظهر ألوان مختلفة ، والأشكال والأحجام ، والتي يمكن أن توفر أدلة على تحديد الكائنات الحية الدقيقة في وقت لاحق .
السمات المستعمرات الشائعة :
التعميم : شائع في معظم البكتيريا .
الأشكال غير النظامية : قد تكون بعض أنواع معينة من البكتيريا .
حواف واضحة وغامضة : المستعمرات مع حواف واضحة عادة ما تكون نقية مثقف ، في حين أن حواف غير واضحة قد تشير إلى أن النباتات هي أكثر تعقيدا .
تغيير اللون : بعض البكتيريا قد تفرز صبغات أثناء زراعة ، مما يؤدي إلى تغيير لون مستعمرة . على سبيل المثال ، المكورات العنقودية الذهبية تنتج المستعمرات الذهبية ، مما يدل على نموها .
5 - تحديد معايير عد مستعمرة
وفقا لأنواع مختلفة من العينات ( مثل مياه الشرب والغذاء والدواء ، وما إلى ذلك ) ، هناك معايير مختلفة . على سبيل المثال :
مياه الشرب : معيار مشترك هو أن مجموع عدد المستعمرات في ملليلتر من الماء لا يتجاوز 500 .
الغذاء : الغذاء قد تكون أكثر صرامة على عدد من المستعمرات ، وعادة ما تقتصر على عدد معين ( على سبيل المثال ، لا أكثر من 10 ، 000 مستعمرات لكل غرام من الغذاء ) .
إذا كان عدد من المستعمرات من نتائج الاختبار يتجاوز القيمة القياسية ، فإنه يدل على أن التلوث الجرثومي في العينة خطيرة ، قد يكون هناك خطر على سلامة الأغذية ، والمشاكل الصحية ، أو غيرها من مشاكل الجودة .
6 - تحليل النتائج
انخفاض عدد المستعمرات : إذا كان عدد من المستعمرات الصغيرة أو لا تنمو ، وهذا يدل على أن عينة من الكائنات الحية الدقيقة منخفضة المحتوى ، تمشيا مع المعايير الصحية .
ارتفاع عدد المستعمرات : إذا تم الكشف عن المزيد من المستعمرات ، قد يكون هناك تلوث في العينة . ومن الضروري مواصلة تحليل مصادر التلوث المحتملة واتخاذ التدابير الصحية المناسبة .
التنوع في المستعمرات : إذا كان شكل مستعمرة مختلفة ، قد تشير إلى أن هناك العديد من أنواع مختلفة من البكتيريا في العينة ، تحتاج إلى مزيد من الاختبارات البيوكيميائية ، الجزيئية وغيرها من وسائل تحديد الهوية .
7 - المسائل المشتركة واستكشاف الأخطاء وإصلاحها
لا نمو مستعمرة : إذا لم يكن هناك مستعمرة في اختبار قطعة ، قد يكون بسبب عدم كفاية التطعيم ، وعدم كفاية الوقت الثقافة ، وسوء معالجة العينات ، وهلم جرا . يمكن أن تزيد من كمية التطعيم أو إطالة فترة الحضانة .
الكثير من المستعمرات : إذا كان هناك الكثير من المستعمرات ، قد يكون بسبب الإفراط في تلوث العينة ، اختبار قطعة من سطح التلقيح غير المتكافئة الأسباب . في هذه الحالة ، يمكن إعادة الكشف عن تمييع العينة .
8 - الاحتياطات
نتيجة مجموع عدد المستعمرات اختبار قطعة هو أداة الفحص ، لا يمكن أن تمثل تماما جميع أنواع الكائنات الحية الدقيقة في العينة . من أجل مزيد من تحليل أنواع وخصائص الكائنات الحية الدقيقة في العينة ، قد يكون من الضروري تحديد أكثر تفصيلا من الكائنات الحية الدقيقة .
العوامل البيئية : طريقة تجهيز العينة ، درجة الحرارة ، الرطوبة وغيرها من العوامل قد تؤثر على نمو مستعمرة ، لذلك فمن الضروري للحفاظ على الاتساق في الظروف التجريبية .
من خلال مراقبة نمو المستعمرات البكتيرية على ورقة ، يمكننا أن نحكم على التلوث الميكروبي في العينة ، ومساعدة المفتشين على تقييم جودة وسلامة العينة .