كثافة الخلية ( عادة ما تصل إلى od600 = 8-12 ) ، العائد من المنتجات ، وخدمة الحياة من المعدات يمكن أن تحسن بشكل ملحوظ من خلال الامتثال الصارم لقواعد التشغيل المذكورة أعلاه . في الممارسة العملية ، ونحن بحاجة إلى إنشاء عملية موحدة مع الجمع بين الخصائص الفسيولوجية من سلالة معينة ، وجعل تشغيل سجل التتبع الأمثل .
وفيما يلي وصف تفصيلي لاستخدام سرير هزاز من سلالة السائل والنقاط الرئيسية :
إعداد وتجهيز الحاويات
1 - اختيار الحاويات والتعقيم
يفضل استخدام زجاجة الثلاثي ( عادة 250-500ml ) أو يربك نوع خزان التخمير ، وفقا لحجم الثقافة في أقل من 70 ٪ من حجم الحاوية نسبة التحميل . الأواني الزجاجية يجب أن تكون معقمة من 121 ℃ ارتفاع ضغط البخار لمدة 30 دقيقة ، الزجاجات البلاستيكية يمكن أن تكون معقمة من أكسيد الإيثيلين التبخير لتجنب بقايا مثبطات تؤثر على نمو البكتيريا .
2 - إعداد وسائل الإعلام
مناسبة متوسطة الثقافة ( على سبيل المثال ، رطل متوسطة الثقافة المستخدمة في كولاي ) تم تكوينها وفقا لخصائص سلالة ، قيمة الرقم الهيدروجيني الأولي ( الرقم الهيدروجيني من البكتيريا العادية 6.8-7.2 فطريات حمضية جزئية ) تم تعديلها . الاستقراء أو السلائف يمكن أن تضاف إلى إثراء بعض الأيضات .
التطعيم وتحميل مواصفات
1 . عملية معقمة
التلقيح هو الانتهاء في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية ، والقطن سدادة يتم سحبها بعد الشعلة تحرق زجاجة الفم ، كمية مناسبة من البكتيريا ( التلقيح المبلغ حوالي 5 ٪ - 10 ٪ ) ، ثم يتم بسرعة مختومة و نقلها إلى طاولة هزاز من خلال نقل النافذة . لاحظ أن مدة العملية يجب أن تكون ضمن مجموعة فعالة من الكحول مصباح لهب .
2 - تحميل متوازن متماثل
الحاوية التي تحتوي على البكتيريا السائل يوضع بشكل متناظر على طاولة هزاز لضمان تحميل موازنة . غريب الأطوار تحميل يمكن أن يؤدي إلى اهتزاز غير طبيعي من المحرك ، وتقصير عمر الجهاز . من المستحسن استخدام ثقل كتلة لملء الشواغر في معظم الثقافات .
إعداد المعلمة ورصد
1 . التحكم في درجة الحرارة
حسب درجة الحرارة المثلى لنمو البكتيريا ( على سبيل المثال ، العفن 30 ℃ حرارة البكتيريا 55 ℃ ) ، بدء التسخين وظيفة لجعل الفرق في درجة الحرارة داخل تجويف ≤ ± 0.5 ℃ . . . . . . . درجة الحرارة الفعلية هو التحقق من كل 4 ساعات في وقت طويل ، وبالتالي تجنب الموت بسبب عدم التحكم في درجة الحرارة .
2 - تنظيم السرعة
النظر في كفاءة الأكسجين المذاب و إجهاد القص الضرر : البكتيريا الهوائية العادية مجموعة 200-300rpm ، الفطريات الخيطية يمكن تعديلها إلى أقل من 150 دورة في الدقيقة . الثقافة اللاهوائية يجب أن تخفض إلى 80-120 دورة في الدقيقة النيتروجين ملء واستبدال الغاز . مراقبة إنتاج رغوة ، إضافة defoaming وكيل إذا لزم الأمر .
3 - إدارة الوقت
باستخدام استراتيجية السيطرة على الوقت مجزأة : تأخر الوقت ( 0-6h ) التكيف مع سرعة منخفضة ، لوغاريتمي المرحلة إلى الهدف سرعة الدوران ، مرحلة مستقرة من التباطؤ إلى إطالة أمد إنتاج انزيم / بوغ تشكيل المرحلة . الحد من سرعة البرنامج 15 دقيقة في وقت مبكر لمنع تأثير الدوامة الحالية الناجمة عن توقف مفاجئ .
إدارة عملية التشغيل
1 - دوريات الحالة
التحقق من البنود التالية كل ساعة : ( 1 ) إذا كان جهاز تثبيت فضفاضة ؛ ② منفذ تصريف المياه التكثيف دون عائق . ③ تغيير مستوى السائل في زجاجة ( الحكم على معدل التبخر ) ؛ صوت غير طبيعي أو رائحة غريبة تظهر .
2 - توقيت السيطرة على تغذية
باستخدام استراتيجية تدفق متقطع ، عندما لا يظهر انخفاض حاد في الأكسجين المذاب الكهربائي ، مصدر الكربون / النيتروجين المصدر هو تكملة العقيم السليكا هلام أنبوب . حجم المكملات الغذائية لا تتجاوز 10 ٪ من حجم العمل في وقت واحد ، وتجنب تغيير مفاجئ في الضغط الاسموزي .
3 - منع التلوث ومكافحته
تم العثور على زيادة غير طبيعية في التعكر فورا إنهاء الثقافة ، وأخذ عينات الفحص المجهري للتأكد من التلوث . عندما تلوث خطير ، يجب مسح الجدار الداخلي مع المطهر أولا ، ثم استخدام الأشعة فوق البنفسجية لمدة 30 دقيقة قبل الاستمرار في استخدام .
خامساً - الحصاد وإعادة التأهيل
1 - تقنيات أخذ العينات
السيفون أو المحاقن المستخدمة في أخذ العينات الجانبية لتجنب اضطراب أسفل الرواسب . قبل وبعد أخذ العينات ، الوزن الرطب التغييرات المسجلة ، والكتلة الحيوية تراكم منحنى تم تحويلها .
2 - معالجة النفايات
أوعية الضغط يجب أن يكون أول من خفض ضغط الدم ثم فتح الثقافة تحتوي على العوامل المسببة للأمراض يجب أن تكون معطلة في 121 ℃ لمدة 30 دقيقة قبل التفريغ . المعدن المشبك هو مغمورة في 75 ٪ إيثانول وتطهيرها ، وقطع من البلاستيك استبدال أكياس القمامة الخاصة مختومة والتخلص منها .
3 - صيانة المعدات
تنظيف الغبار المتراكم في مروحة فلتر الشاشة كل شهر ، والحفاظ على ضيق حزام محرك الأقراص كل ثلاثة أشهر . عندما لا تستخدم لفترة طويلة ، خزان المياه هو إفراغ الشحوم السيليكون المغلفة مع مانع االصدأ .