الطريقة الأساسية لتجنب تجمع الخلايا في خلية ثقافة الجاذبية الصغرية

1 - تحسين كثافة التلقيح : التحكم في تركيز الخلايا الأولية في 1 × 10 × 10 × 10 خلايا / مل ( حسب نوع الخلية ) ، وتجنب الإفراط في تركيز يؤدي إلى التجميع الطبيعي .

2 - اختيار وسائل الإعلام المناسبة : إضافة كمية مناسبة من antiaggregators ( مثل 0.1 في المائة ～ 0.5 في المائة methylcellulose ، pralan السكاريد ) ، أو استخدام المصل / المصل خالية من وسائل الإعلام للحد من البروتين بوساطة الالتصاق .

3 - تعزيز التوازن الديناميكي من نظام الثقافة : الحفاظ على 5 ~ 20 دورة في الدقيقة التناوب ، تفريق الخلايا من خلال السائل إجهاد القص باستخدام وظيفة التحكم في سرعة tdccs-3d بدقة . استبدال 1 / 3 من وسائل الإعلام بانتظام ، وإزالة النفايات الأيضية و تجميع عوامل الحث .

4 - الخلايا المعالجة والحاويات : استخدام التربسين بلطف هضم كتلة الخلية قبل التلقيح لضمان تعليق خلية واحدة . الجدار الداخلي من الثقافة زجاجة تعامل مع ماء أو طلاء ( على سبيل المثال ، polylysine ) للحد من احتمال التصاق الخلايا .

5 - تنظيم ثقافة البيئة بدقة : الحفاظ على درجة الحموضة 7-2 ~ 7-4 ، درجة الحرارة 37 ℃ ± 0.5 ℃ ، وتجنب الإجهاد الناجم عن التقلبات البيئية ؛ بعض الخلايا يمكن أن تضاف مع EDTA ( 0.02 في المائة ) للمساعدة في تفريق .