ببتيد الاصطناعية الصكالمعايرة هي واحدة من الخطوات الرئيسية لضمان نقاء المنتج ، العائد و تكرار التجربة ، لذلك يجب أن تكون منهجية معايرة وحدات رئيسية مثل السائل مدخل الدقة ، التحكم في درجة الحرارة ، الضغط والاستقرار ، ونظام الكشف . التالية هي خطوة بخطوة عملية المعايرة التي تتفق مع معيار الصناعة ، تنطبق على صلب المرحلة ببتيد التوليف .

إعداد قبل المعايرة : البيئة ومعدات المعالجة

الظروف البيئية تؤكد أن درجة الحرارة في المختبر سوف تكون مستقرة في 20-25 ℃ ( تذبذب ≤ ± 1 ℃ ) ، الرطوبة النسبية في 40 ٪ - 60 ٪ ، لتجنب تدفق الهواء مباشرة تهب المعدات . الاحماء المعدات قبل ساعة من المعايرة ، وضمان أن كل وحدة في حالة عمل مستقرة .

إعداد أدوات ومواد مرجعية معيارية : إعداد معايرة المعدات القياسية ( على سبيل المثال ، 0.01mg ميزان الحرارة ، ميزان الحرارة القياسية ، الدقة قياس الضغط ، 100 μ ل ماصة القياسية ) ، اللامائية الميثانول ( كروماتوجرافيا نقية ) ، indanetrione حل القياسية ( 0.1mol / l ) .

تنظيف وفحص المعدات : إزالة خط أنابيب تغذية السائل ، رد فعل العمود ، شطف مع الميثانول اللامائية ثلاث مرات قبل التجفيف . تحقق من اسطوانة غاز النيتروجين الضغط ( ≥ 0.5 الآلام والكروب الذهنية ) ، واستبدال الشيخوخة ختم حشية ، وضمان عدم تسرب خط .

معايرة وحدة أساسية : دقة السيطرة على البارامترات الرئيسية

( أ ) معايرة نظام تغذية السائل : ضمان دقة قياس الكاشف

معايرة تدفق السائل مضخة مدخل : اختيار مشترك حجم السائل ( 10 μ ل ، 50 μ ل ، 100 μ ل ) ، وتحديد معدل تدفق السائل 10 μ ل / ث ، إدراج نهاية أنبوب مدخل السائل في تنظيف أنابيب الطرد المركزي وزنها قبل البدء في برنامج التغذية . كرر كل حجم التدرج ثلاث مرات ، وزن كتلة من الميثانول اللامائية التي تم جمعها مع ميزان الكتروني ، وحساب حجم السائل الفعلي على أساس كثافة الميثانول ( 0.7918g / ml في 20 ℃ ) ، الخطأ يجب أن يكون أقل من ± 2 ٪ ، أو ضبط ضغط المضخة أو استبدال الختم الدائري .

معايرة دقة توزيع الكواشف : ربط مختلف الكواشف الأنابيب على التوالي إلى مستوى السائل نقل واجهة ، تعيين واحد توزيع 50 ميكرولتر ، وتكرار توزيع 10 مرات في قدرة زجاجة ، والتحقق من حجم الخطأ الكلي باستخدام طريقة الحجمي ، وضمان أقل من ± 1 ٪ ؛ وفي الوقت نفسه ، فإنه يحتاج إلى أقل من 0.5 ثانية للتحقق من فرق التوقيت بين خطوط متعددة في وقت واحد .

` 2 ` معايرة نظم الحرارة والضغط : بيئة تفاعل مستقرة

معايرة درجة حرارة التفاعل : إدراج الحرارة القياسية في رد فعل العمود ( بالقرب من منطقة الراتنج ) ، على التوالي ، تعيين 25 ℃ ، 30 ℃ ، 40 ℃ ثلاث نقاط درجة الحرارة المشتركة ، والحفاظ على الحرارة لمدة 30 دقيقة بعد قراءة قيمة درجة الحرارة ، كل نقطة كرر ثلاث مرات ، الخطأ يجب أن يكون أقل من ± 0.5 ℃ . . . . . . . إذا كان يتجاوز المعايير ، من خلال معدات التحكم في درجة الحرارة وحدة معلمة تصحيح أو استبدال عنصر التدفئة .

النيتروجين الضغط المعايرة : إغلاق منفذ من رد فعل العمود ، ربط الدقة قياس الضغط في مدخل النيتروجين ، ووضع الضغط 0.1mpa 0.2mpa , و 0.3mpa ، قراءة بعد 5 دقائق من الاستقرار ، الخطأ يجب أن يكون أقل من ± 0.01mpa . . . . . . . بعد المعايرة ، تطهير قيم من النيتروجين هو اختبار للتأكد من أن الراتنج هو تحول بالتساوي و لا ترش .

` 3 ` اختبار ومعايرة وحدات التحكم : ضمان دقة رصد العملية

معايرة نظام اختبار indanetrione : إعداد indanetrione حل القياسية مع تركيز 0.01 ملمول / لتر ، 0.05 ملمول / لتر ، 0.1 ملمول / لتر ، تسجيل الامتصاصية و رسم المنحنى القياسي ، معامل الارتباط يجب أن يكون أكثر من 0.995 . إذا كان خطي ليست جيدة ، وتنظيف مسار الضوء أو استبدال مصدر الضوء .

برنامج مراقبة المعايرة : كتابة برنامج التوليف القياسية ( بما في ذلك ثلاث خطوات من deprotection والغسيل اقتران ) ، سجل الانحراف بين وقت التنفيذ الفعلي و وقت الإعداد لكل خطوة ، كرر 5 مرات ، الانحراف يجب أن يكون أقل من ± 1 ثانية . التحقق من خط أنابيب التبديل استجابة خطوة التبديل ، وضمان عدم وجود كاشف المتبقية عبر التلوث .

التحقق وتسجيل بعد المعايرة : ضمان صحة المعايرة

التحقق من عدم تحميل العملية : تنفيذ معايرة عدم تحميل برنامج التوليف ، تشغيل ثلاث دورات متتالية ، والتحقق من حالة تشغيل كل وحدة ، وضمان عدم تسرب السائل ، الضوضاء غير طبيعي ، المعلمة الانجراف ، وهلم جرا .

معيار الببتيد التوليف التحقق : معيار pentapeptide ( مثل ليو enkephalin ) تم اختياره لتجميع المنتج نقاء الكشف عن هبلك ، يجب أن يكون أكثر من 95 ٪ ، و الانحراف عن البيانات التاريخية بعد المعايرة هو أقل من ± 2 ٪ ، لتأكيد معايرة تأثير .

معايرة السجلات المحفوظة : سجلات مفصلة تاريخ المعايرة ، والظروف البيئية ، معايرة الموظفين ، والمعدات القياسية الأرقام القياسية ، معايرة البيانات والانحراف القيم لكل وحدة ، لصق علامات المعايرة المؤهلة ، وتحديد فترة المعايرة التالية ( مرة كل 6 أشهر ، أو 500 مرة قبل المعايرة بعد التوليف ) .